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對于初學(xué)者而言,養(yǎng)原代細胞就像養(yǎng)孩子一樣,,有空就要去看看,。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看,。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞,。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的,。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境,。你跑去看細胞,,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了,。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎毎鲜情L不好,。老手細胞一扔好幾天不管,,細胞瘋長。
在傳代的時候,,初學(xué)者往往生怕細胞消化過度,,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,,吹得滿瓶子都是氣泡,。在我看來,用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大,。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,,37度消化過夜,細胞也沒事,。我一般是等細胞*變圓后才中止消化,。細胞輕輕一晃就能下來。還有,,動作要輕柔,,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應(yīng)力相當大,,對細胞的傷害也是很大的,。
大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染,。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,?知道為什么嗎,?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候,,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,,空氣變冷,,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,,釋放出來,。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿,。如果不燒瓶口的話,,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰,。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼,。如果有細菌的話,,這么晃兩下也燒不死多少,。原代細胞要想燒死全部細菌,,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口,。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈。
西洛他唑 含量測定 100mg 100363-200301
氯唑沙宗 含量測定 50mg 100364-200301
茴拉西坦 含量測定 100mg 100365-200401
卡洛磺鈉 含量測定 100mg 100366-200702
奧美拉唑 含量測定 100mg 100367-201003
維生素B2 HPLC法含量測定 100mg 100369-200502
泛酸鈣 HPLC法含量測定 50mg 100370-200301
阿苯達唑 含量測定 100mg 100373-200502
苯磺酸氨氯地平 含量測定 100mg 100374-200903
原代細胞
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