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當(dāng)前位置：上海研生實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>人外周T細(xì)胞的分離與鑒定
材料：淋巴細(xì)胞株懸液、1%SRBC懸液,、滅活之小牛血清,、離心管、試管,、吸管,、載玻片、0.8%戊二醛,、瑞氏染液,。
方法
（1）取上述配好之淋巴細(xì)胞懸液0.1ml于潔凈小試管中，加入1%SRBC懸液0.1ml。再加入小牛血清0.1ml,，混勻,，置37℃水浴箱中5分鐘，500轉(zhuǎn)/分,，離心5分鐘,，放4℃冰箱2-24小時(shí)。
（2）從冰箱中取出試管,，留適量上清液,，輕輕搖勻，加0.8%戊二醛2滴,，輕搖后,，置4℃冰箱15分鐘，取出,，作成涂片,，待自然干燥，以瑞氏染液染色,。
（3）計(jì)數(shù)：鏡下觀察,，凡結(jié)合三個(gè)以上SRBC的T細(xì)胞株即為E-RFC，計(jì)數(shù)200個(gè)淋巴細(xì)胞,，求出E-RFC占淋巴細(xì)胞總數(shù)的百分率,。
結(jié)果
一般認(rèn)為E-RFC的正常值在60％以上，如少于50％則為低下,。如欲分離T細(xì)胞,，可用密度梯度離心，E-RFC因比重增大而沉于管底,，與其他細(xì)胞株分離,；用低滲法裂解花結(jié)中的SRBC，即可獲得純化的T細(xì)胞,。
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