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人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,;NCI-H446*操作步驟:
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,,4%的多聚甲醛固定爬片15min,,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min,。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),,PBS沖洗3次,每次3min,。
5. 封閉血清室溫孵育20min,,PBS沖洗3次,每次3min,。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書稀釋比例稀釋好一抗,,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,,PBS沖洗3次,,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,,按比例稀釋后滴加在爬片上,,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,,每次3min,。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,,顯微鏡下觀察,,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),,再用蓋玻片蓋上,,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干,。
11. 鏡檢觀察。
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,;NCI-H446*現(xiàn)貨直銷,,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,,細(xì)胞系,,種類齊全,現(xiàn)貨,,質(zhì)量保證,,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷,。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書,。
產(chǎn)品名稱 | |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁/懸浮生長(zhǎng),混合
特征特性 該細(xì)胞是1982年由Carney D和Gazdar AF等從一位小細(xì)胞肺癌患者的胸腔積液中建立的,。細(xì)胞的原始形態(tài)并不具有小細(xì)胞肺癌特征,。這個(gè)細(xì)胞株是小細(xì)胞肺癌的生化和形態(tài)學(xué)上的變種,表達(dá)神經(jīng)元*的烯醇酶和腦型肌酸激酶同工酶,;左旋多巴脫羧酶,、蠶素、抗利尿激素,、催產(chǎn)素或胃泌激素釋放肽未達(dá)到可檢測(cè)水平,。與正常細(xì)胞相比,該細(xì)胞c-myc DNA序列擴(kuò)增約20倍,,RNA增加15倍,。zui初傳代培養(yǎng)基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10 nM氫的松,、0.005 mg/ml胰島素,、0.01 mg/ml轉(zhuǎn)鐵
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 1:2,。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿,。
傳代情況 P(87+5)
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),,若干冰已經(jīng)*融化,,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境,。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途:只可用于科研,。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,,這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度,。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,,周五更換培養(yǎng)基,。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞,。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問(wèn)題(人為或者非人為),,導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,,支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker,,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款,。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),,用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
組織人類巨細(xì)胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
血液人類巨細(xì)胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
體液人類巨細(xì)胞病毒蛋白酶(HCMV PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
細(xì)胞3C類蛋白酶(SARS -CoV 3C-like PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
組織3C類蛋白酶(SARS -CoV 3C-like PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
細(xì)胞艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1 PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
組織艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1 PROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
細(xì)胞切割酶/β分泌酶(MENAPSIN 2,;β-SECRETASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
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細(xì)胞蛋白酶(PROTEASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次
1S,2S)-N,N'-Dimethyl-1,2-cyclohexanediamine(1S,2S)-(+)-N,N'-二基-1,2-環(huán)己87583-89-9
Stannous methanesulfonate基磺酸錫53408-94-9
Sodium 1-naphthalenesulfonate1-萘磺酸130-14-3
23-0500-2NAC( 抗氧化劑 )2g
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )50L
醛縮酶100mg
冷啟動(dòng)核酸酶10,000U
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