詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
商品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 產品分類 | 抗體來源 |
線粒體核糖體蛋白S28抗體 | 50ul,、100ul、200ul | 抗體 / 一抗 | Rabbit |
規(guī)格 50ul 100ul 200ul
產品分類 抗體 / 一抗
英文名稱 :MRPS28
英文別名 28S ribosomal protein S28; 28S ribosomal protein S35; HSPC007; Mitochondrial 28S ribosomal protein S35; mitochondrial; Mitochondrial ribosomal protein S28; MRP-S28; MRP-S35; MRPS 28; mrps28; MRPS35; RT28_HUMAN; S28mt; S35mt.
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
標記 Unconjugated
抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MRPS28
蛋白細胞定位 細胞漿
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 :
Mammalian mitochondrial ribosomal proteins are encoded by nuclear genes and help in protein synthesis within the mitochondrion. Mitochondrial ribosomes (mitoribosomes) consist of a small 28S subunit and a large 39S subunit. |
免疫熒光技術的實驗步驟:
一,、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液,、緩沖甘油,、搪瓷桶三只,、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡,、玻片架,、濾紙,、37℃溫箱等。
二,、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,,十分鐘后棄去,,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,,使其覆蓋標本,,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考,。
3.取出玻片,置玻片架上,,先用0.01mol/L,,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,,并不停地搖晃振蕩,。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,,以蓋玻片覆蓋,。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,。
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抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液,;
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
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