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中文名稱 | 鉀離子通道蛋白7抗體 |
英文名稱 | KCNK7 |
規(guī)格 | 50ul 100ul 200ul |
產(chǎn)品分類 | 抗體 / 一抗 |
英文別名 TWIK-3; TWIK 3; KCNK7_HUMAN; Potassium channel subfamily K member 7; TWIK3; Two pore domain K+ channel.
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
標(biāo)記 Unconjugated
抗體來(lái)源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KCNK7
蛋白細(xì)胞定位 細(xì)胞膜
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲(chǔ)存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 This gene encodes a member of the superfamily of potassium channel proteins containing two pore-forming P domains. The product of this gene has not been shown to be a functional channel;
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備 | 2. 免疫動(dòng)物 | 4. 免疫血清 |
普通的大分子蛋白,,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。 小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。 | 常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。 3. 免疫血清的收集 一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。 | 純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化 ,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有 高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要 鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量,、 純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建 議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。 |
抗體作用:
1,、中和毒素和阻止病原體入侵,抗體在體外可發(fā)生各種抗原,、抗體結(jié)合反應(yīng),,有利于抗原或抗體檢測(cè)、功能判斷,,在體內(nèi)可中合毒素,、阻斷病原體入侵、清除病原微生物。
2,、激活補(bǔ)體產(chǎn)生攻膜復(fù)合物,,使細(xì)胞溶解破壞,抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,,可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體系統(tǒng),,產(chǎn)生多種效應(yīng)功能。
3,、調(diào)理吞噬和抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用,,調(diào)理作用是指IgG抗體的FC段與中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面下段FC受體結(jié)合,,從而增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用,。抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用是指具有殺傷活性的細(xì)胞,,如NK細(xì)胞,,通過(guò)其表面的FC受體,識(shí)別包被于靶細(xì)胞表面抗原上的抗體FC段,,直接殺傷靶細(xì)胞,。
4、介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng),。
5,、穿過(guò)胎盤屏障和黏膜,IgG是能夠通過(guò)胎盤的抗體,,對(duì)于新生兒的抗感染具有重要意義,。
6、分泌型的IgA可通過(guò)呼吸道和消化道黏膜,,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用,。
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷,。然而,,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用,。
(2)活補(bǔ)體:IgM,、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,,凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,,參與免疫應(yīng)答,。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
免疫,。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),,也具有刺機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能,。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性,。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),,均能破壞抗體的作用,。抗體可被中性鹽類沉淀,。在上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化,。
![5.png 5.png](https://img61.chem17.com/1cba7c2130d463f07380cc2755eef18e70894ceede797991ce90e1cfbc6467cd267a080c6aabc1a4.png)
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一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說(shuō)的抗體,,即能和抗原特異性結(jié)合。
第二抗體是能和抗體結(jié)合的,,即抗體的抗體,。主要用于檢測(cè)抗體的存在。
一抗是針對(duì)抗原的抗體,,二抗是針對(duì)一抗的抗體,。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說(shuō),,抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。
一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),,而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗),。
一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識(shí)別出我們想要檢測(cè)的東西,。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來(lái)的。
二抗:可以和一抗結(jié)合,,并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記(如帶熒光,、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),,作用是檢測(cè)一抗,。 如果一抗自己帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記(如帶熒光,、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)),,則不需要二抗,。但這樣成本很高,因?yàn)橐环N一抗只識(shí)別一種底物,。所以如今的設(shè)計(jì)一般是二抗帶上可檢測(cè)標(biāo)記,,再來(lái)檢測(cè)一抗。而一抗識(shí)別底物,。這樣,,當(dāng)一抗結(jié)合到底物上,就可以通過(guò)二抗檢測(cè)出來(lái),。
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