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參 考 價 | 面議 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50ul 100ul 200ul |
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應用領域 | 化工,生物產業(yè) | 主要用途 | 產品僅供科研 |
英文名稱 | ZNF677 | 抗體來源 | Rabbit |
抗體類型 | Polyclonal | 交叉反應 | Human |
亞型 | IgG | 保存條件 | Shippedat4℃.Storeat-20°C |
優(yōu)勢:
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中文名稱 | 鋅指蛋白677抗體 |
英文名稱 | ZNF677 |
規(guī)格 | 50ul 100ul 200ul |
產品分類 | 抗體 / 一抗 |
英文別名 Zinc finger protein 677; ZN677_HUMAN.
交叉反應 Human
標記 Unconjugated
抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNF677
蛋白細胞定位 細胞核
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 ZNF677 belongs to the krueppel C2H2-type zinc-finger protein family. It contains ten C2H2-type zinc fingers and one KRAB domain. ZNF677 may be involved in transcriptional regulation.
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備 | 2. 免疫動物 | 4. 免疫血清 |
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。 小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。 | 常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。 3. 免疫血清的收集 一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。 | 純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化 ,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有 高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要 鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量、 純度以及特異性,。5. 免疫血清的保存建 議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。 |
抗體作用:
1、中和毒素和阻止病原體入侵,,抗體在體外可發(fā)生各種抗原、抗體結合反應,,有利于抗原或抗體檢測、功能判斷,,在體內可中合毒素,、阻斷病原體入侵,、清除病原微生物。
2,、激活補體產生攻膜復合物,,使細胞溶解破壞,,抗體與相應抗原結合后,,可通過經典途徑激活補體系統(tǒng),,產生多種效應功能。
3,、調理吞噬和抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用,,調理作用是指IgG抗體的FC段與中性粒細胞,、巨噬細胞表面下段FC受體結合,從而增強吞噬細胞的吞噬作用,??贵w依賴的細胞介導的細胞毒性作用是指具有殺傷活性的細胞,如NK細胞,,通過其表面的FC受體,,識別包被于靶細胞表面抗原上的抗體FC段,,直接殺傷靶細胞。
4,、介導Ⅰ型超敏反應。
5,、穿過胎盤屏障和黏膜,,IgG是能夠通過胎盤的抗體,對于新生兒的抗感染具有重要意義,。
6、分泌型的IgA可通過呼吸道和消化道黏膜,,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷,。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,,直接發(fā)揮中和病毒的作用,。
(2)活補體:IgM,、IgG1,、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,,凝聚的IgA,、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,,可結合不同種的細胞,,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,,使胎兒形成自然被動
免疫,。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素,。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,,各具有不同的抗原性,。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞,。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀,。在上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,,再經透析法將其純化,。
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一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,,即能和抗原特異性結合,。
第二抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體,。主要用于檢測抗體的存在,。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體,。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體,。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產生免疫應答,,由B細胞可以產生與相應抗原發(fā)生特異性結合的特殊蛋白質,。
一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團,,而且一抗可以至少結合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結合底物,,就是識別出我們想要檢測的東西,。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的,。
二抗:可以和一抗結合,,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性,、化學發(fā)光或顯色基團),,作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光,、放射性,、化學發(fā)光或顯色基團),則不需要二抗,。但這樣成本很高,,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記,,再來檢測一抗,。而一抗識別底物。這樣,,當一抗結合到底物上,,就可以通過二抗檢測出來。
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