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組織蛋白酶A(CTSA)真核蛋白大鼠

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2023-03-22 10:24:27瀏覽次數:283次

聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D3065 應用領域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Eukaryotic Cathepsin A (CTSA)
物種 Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)
組織蛋白酶A(CTSA)真核蛋白大鼠公司正在出售的產品:G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白抗體 英文名稱:GPRC5C 0.2mlG蛋白偶聯(lián)受體結合蛋白α14/Gα 14 抗體 英文名稱:GNA14 0.2mlG蛋白β5/Gβ 5 抗體 英文名稱:GNB5 0.2ml

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,,通過瞬時表達產生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容:純化好的目標蛋白及純化報告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上,。

產品屬性:

產品名稱

物種

貨號

組織蛋白酶A(CTSA)真核蛋白大鼠

Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)

GOY-01D3065

 

 

英文名稱:Eukaryotic Cathepsin A (CTSA)

CTS-A; GLB2; GSL; NGBE; PPCA; PPGB; Protective Protein For Beta-Galactosidase; Galactosialidosis; Carboxypeptidase C; Carboxypeptidase L

型號:GOY-01D3065

酶與激酶

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來源:真核表達

宿主CHOS

內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::溶酶體

預測分子量:53.0kDa

實際分子量:55kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Ala42~Tyr493 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:5.3

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
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操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,,離心10000轉/分,,4℃離心5 min;

4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,,轉至新的預冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細胞數量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

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2 ug pmCherry-LC3 pmCherry-LC3 低溫運輸,-20℃保存

25mL Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (non-reducing,4X)   Laemmli’s (SDS-Sample) Buffer (non-reducing,4X)   常溫保存

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1 管 Rosetta-gamiB(DE3)plysS大腸桿菌 Rosetta-gami B(DE3)plysS E.coli Strain -80℃保存

植物乙酸(IAA)免疫試劑盒

 


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