蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ubiquilin 4 (UBQLN4)

A1U; UBIN; C1orf6; CIP75; A1Up; Connexin43-interacting protein of 75 kDa; Ataxin-1 ubiquitin-like-interacting protein A1U; Ataxin-1 interacting ubiquitin-like protein

型號：GOY-01D2944

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞核, 細胞質(zhì), 染色體

預測分子量：67.6kDa

實際分子量：69kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Met1~Ser601 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 80%

等電點：4.9

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 4 (ADAMTS4)產(chǎn)品名稱：血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶4(ADAMTS4)重組蛋白物種：Rabbit，兔ADMP-1; Aggrecanase-1

Active Caspase 3 (CASP3)產(chǎn)品名稱：胱天3(CASP3)活性蛋白物種：Human,，人CPP32; CPP32B; SCA1; Apoptain; Yama; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 3; SREBP cleavage activity 1

Recombinant Protein Kinase, cGMP Dependent Type I (PRKG1)產(chǎn)品名稱：cGMP依賴性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)重組蛋白物種：Mouse,，小鼠CGKI; PGK; PRKG1B; PRKGR1B; cGKI-BETA; cGKI-alpha; cGMP-dependent protein kinase 1

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

NCI-H446(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion

S-甲基-3-硫代 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 S-Methyl-3-thioacetaminophen

 THP-1(人髓系白血病單核細胞)5×106cells/瓶×2

4-鉀鹽 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 4-Acetaminophen Sulfate Potassium Salt

 人直腸粘膜上細胞培養(yǎng)基100mL

3-(N-乙酰-L-半胱氨-S-基)鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen Sodium Salt

 L1210(小鼠白血病細胞)5×106cells/瓶×2

4-鹽-d3 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 4-Acetaminophen-d3 Sulfate

 中國蘭平板/中國藍平板/China Blue Agar Plate10塊國產(chǎn)/進口

2-十八單甘油酯 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 2-Oleoylglycerol

 Ca Ski, 人宮頸細胞

1-月桂酰-3-二 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 1-Lauroyl-3-chloropropanediol

 SiHa(人子宮頸鱗細胞)5×106cells/瓶×2

月桂酰-DL-肉毒堿化物 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 Lauroyl-DL-carnitine chloride

 J82(人膀胱細胞)5×106cells/瓶×2

1,2-二月桂酰-sn-甘油-3- 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 1,2-Dilauroyl-sn-glycero-3-phosphocholine

泛醌蛋白4(UBQLN4)重組蛋白人125mL RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液）,20X,，pH7.4   RNase-Free TE Buffer,20X，pH7.4   常溫保存

伊紅美藍瓊脂(EMB) Eosin-Methylene Blue Agar 250g

大鼠腦啡肽(ENK)免疫試劑盒進口,、組裝

50T 嗜肺軍團菌16S rRNA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法)  低溫運輸,，-20℃保存

5mL CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒 Cell Counting Kit-8 4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存兩年有效

50T 乙型肝炎病毒核酸定量及YMDD變異聯(lián)合PCR測定試劑盒  低溫運輸,，-20℃保存

BBL瓊脂培養(yǎng)基 BBL Agar Medium 250g

2 ug pBAD/gIII A pBAD/gIII A 低溫運輸,，-20℃保存

鵝鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應

R3增殖培養(yǎng)基  250g

營養(yǎng)鹽瓊脂（AATCC30） Nutrient-salts Agar 250g