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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 09:26:02瀏覽次數(shù):508次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D2895 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Flap Structure Specific Endonuclease 1 |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Asparaginyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (NARS2)產(chǎn)品名稱:天冬酰tRNA合成酶2(NARS2)重組蛋白物種:Human,,人AsnRS; Asparaginyl-tRNA synthetase
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Active Deoxyribonuclease I (DNASE1)產(chǎn)品名稱:脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)活性蛋白物種:Human,,人DNaseI; DNL1; DRNI; DNase-I; Dornase alfa
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
皮瓣結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶(FEN1)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,,人) | GOY-01D2895 |
英文名稱:Recombinant Flap Structure Specific Endonuclease 1 (FEN1)
MF1; RAD2; Maturation Factor-1; DNase IV
型號(hào):GOY-01D2895
酶與激酶
遺傳科學(xué)
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 線粒體
預(yù)測(cè)分子量:25.2kDa
實(shí)際分子量:26kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Met1~Thr195 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):6.9
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
MV3(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Mezlocillin
ME-180(人子宮頸表細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
二去甲基米非司 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Didemethyl Mifepristone
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米平-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Mirtazapine-d3
CT26.WT(小鼠結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
米平N-氧化物 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Mirtazapine N-Oxide
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:PA317
10-氧米平(米平雜質(zhì)F) 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 10-Oxo Mirtazapine (Mirtazapine Impurity F)
A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
1-氧米平(米平雜質(zhì)C) 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 1-Oxo Mirtazapine (Mirtazapine Impurity C)
皮瓣結(jié)構(gòu)特異性核酸內(nèi)切酶(FEN1)重組蛋白人人葡萄糖激(GCK)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
50T 創(chuàng)傷弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
50mL Potassium Acetate Solution(乙酸鉀溶液),1M,pH7.5 Potassium Acetate Solution,1M,pH7.5 常溫保存
1瓶 RTE細(xì)胞株 RTE 低溫運(yùn)輸和保存
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
氯硝胺18%甘油(DG18)瓊脂 DG18 Agar 250g
馬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
碘伏(液體) Povidone-iodine (liquid) 500g
含225mlGN增菌液均質(zhì)袋 GN Enrichment Broth 10個(gè)/包
人ICE蛋白激活因子(IRAP)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
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