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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 天冬酰tRNA合成酶2(NARS2)重組蛋白大鼠
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產(chǎn)品型號(hào)
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-22 08:56:47瀏覽次數(shù):224次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D2803 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Asparaginyl tRNA Synthetase 2, Mitocho |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
天冬酰tRNA合成酶2(NARS2)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) | GOY-01D2803 |
英文名稱:Recombinant Asparaginyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (NARS2)
AsnRS; Asparaginyl-tRNA synthetase
型號(hào):GOY-01D2803
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:31.5kDa
實(shí)際分子量:32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Arg148~Ala391 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):5.0
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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(S)-?;?β-D-葡萄糖苷 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (S)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
A549(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
(S)-異酰基-β-D-葡萄糖苷 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞
(R)-?;?β-D-葡萄糖苷 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
(1RS)-1-(6--2-萘基)乙(雜質(zhì)K) 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)
天冬酰tRNA合成酶2(NARS2)重組蛋白大鼠100支 1000 μL RNase-free 藍(lán)吸頭(盒裝已滅菌帶芯) 常溫
小鼠花生四烯酸12 - 脂氧合,12S型(Alox12/Alox12p)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
50T 水泡病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
溴化十六烷基銨瓊脂培養(yǎng)基(2015藥典) Getrimide Agar 250g
倉(cāng)鼠白介素3(IL-3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
2 ug pPIC 3.5K pPIC 3.5K 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
125mL NP40 Lysis Buffer with Glycerol,2X(含甘油型NP40裂解液,,2X) NP40 Lysis Buffer with Glycerol,2X 常溫保存
小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
雞白介素2(IL-2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
50T 人皰疹病毒6型PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
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