蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和,，離子交換,，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Lipidosin (LPD)

ACSBG1; BG1; BGM; GR-LACS; hBG1; hsBG; Bubblegum; Very Long-Chain Acyl-CoA Synthetase; Acyl Coenzyme A Synthetase Bubblegum Family, Member 1

型號(hào)：GOY-01D2740

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：34kDa

實(shí)際分子量：44kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Asn271 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：5.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)產(chǎn)品名稱：周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白物種：Rat,，大鼠PSSALRE; CDKN5; Cell division protein kinase 5; Serine/threonine-protein kinase PSSALRE; Tau protein kinase II catalytic subunit;TPKII catalytic subunit

Recombinant Carboxypeptidase A5 (CPA5)產(chǎn)品名稱：羧肽酶A5(CPA5)重組蛋白物種：Human,，人酶與激酶

Recombinant Glucuronidase Beta (GUSb)產(chǎn)品名稱：葡萄糖苷酸酶β(GUSb)重組蛋白物種：Rat，大鼠GUS-B; MPS7; Beta-G1

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠淋巴瘤細(xì)胞英文名稱：EL4

奧昔康唑 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Oxiconazole

 A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

土半鈣鹽 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Oxytetracycline hemicalcium salt

 AC肉湯/通用培養(yǎng)肉湯/AC Broth用于常見(jiàn)微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無(wú)菌試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

α-Apo-土 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 α-Apo-oxytetracycline

 神經(jīng)母細(xì)胞瘤英文名稱：M17

β-Apo-土 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 β-Apo-oxytetracycline

 人腺導(dǎo)管細(xì)胞英文名稱：MDA-MB-435S

二水合土 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 Oxytetracycline Dihydrate

 Rustigian氏尿素培養(yǎng)液/ Rustigian氏尿素肉湯/Rustigian Urea Broth細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

4-差向土 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 4-Epioxytetracycline

 人黑色素瘤細(xì)胞英文名稱：MV3

6α-羥基 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 6α-Hydroxy Paclitaxel

 Hep B1.2(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl) 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口 2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)paclitaxel

Lipidosin蛋白(LPD)重組蛋白小鼠RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基（2015藥典） RV Salmonella Enrichment Medium 250g

5g 戊鈉 Pentobarbital Sodium Salt  室溫保存

2 ug pProEX-c pProEX-c 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

2 ug pLVX-ZsGreen1-C1 pLVX-ZsGreen1-C1 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

倉(cāng)鼠細(xì)胞色素P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

5g 4- 氯 -1- 萘 4-Chloro-1-Naphthol（4-CN） -20℃保存

250mL Blocking Reagent with Triton X-100 & Sheep Serum Blocking Reagent with Triton X-100 & Sheep Serum 常溫保存

假單胞分離瓊脂 Pseudomonas Isolation Agar 250g

人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

2mL 醛基磁珠 Magnetic beads,Aldehydic  4℃密閉,、豎直保存

豬降鈣素原(PCT)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝