詳細介紹
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上,。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
泛素樣修飾激活酶3(UBA3)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,,人) | GOY-01D2653 |
英文名稱:Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 3 (UBA3)
UBE1C; NEDD8-Activating Enzyme E1 Catalytic Subunit; Ubiquitin-like modifier-activating enzyme 3; Ubiquitin-activating enzyme E1C
型號:GOY-01D2653
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預測分子量:28.1kDa
實際分子量:28kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Ser241~Lys458 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:5.5
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關產(chǎn)品:
Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)產(chǎn)品名稱:醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白物種:Mouse,,小鼠DHQU; DIA4; DTD; NMOR1; NMORI; QR1; Azoreductase; DT-diaphorase; Menadione reductase; Phylloquinone reductase; Quinone reductase 1; NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1
Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)產(chǎn)品名稱:肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白物種:Dog,犬CK-MM; CKMM; CK3; CK-M; MM-CK; M-CK; Creatine kinase M-type, N-terminally processed
Recombinant Vanin 3 (VNN3)產(chǎn)品名稱:血管非炎性蛋白3(VNN3)重組蛋白物種:Human,,人Vascular non-inflammatory molecule 3
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人外周血白細胞培養(yǎng)基100mL
4-戊氧基二甲(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 4-Pentyloxyphthalonitrile
5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽細胞系 Human
四氟鄰二甲(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) Tetrafluorophthalonitrile
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
1,4,5,6-四氫-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲(>98.0%(HPLC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T) 1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile
異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
1,2-萘二甲(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 1,2-Naphthalenedicarbonitrile
BRL-3A(大鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2
1-雜-15-冠-5-(>98.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 1-Aza-15-crown 5-Ether
NCI-H446(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2
1-雜-18-冠-6-(>98.0%(GC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T) 1-Aza-18-crown 6-Ether
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
1-雜-12-冠4-(>98.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 1-Aza-12-crown 4-Ether
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
4'-乙酰并-15-冠-5-(>95.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether
泛素樣修飾激活酶3(UBA3)重組蛋白人25g 甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷 Methylα-D-Mannopyarnoside 室溫干燥保存
人抗磷脂酰抗體(IgM)免疫試劑盒進口,、組裝
人ADP-核糖基化因子4(ARF4)免疫試劑盒進口,、分裝
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)IgG抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應
1g 魚藤酮 Rotenone 室溫避光保存
人細胞因子信號轉(zhuǎn)導抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒進口、分裝
大鼠凝血受體(TR)免疫試劑盒進口,、組裝
50T 登革熱病毒Ⅰ,、Ⅱ型PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
大鼠白介素22(IL-22)免疫試劑盒進口,、組裝
250ml Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB) Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB) 常溫保存
無鹽胰胨水 20支