蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和,，離子交換,，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Phospholipase A2, Group III (PLA2G3)

GIII-SPLA2; sPLA2-III; Group 3 secretory phospholipase A2; Group III secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 3

型號(hào)：GOY-01D2465

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：31.4kDa

實(shí)際分子量：31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Gly20~Leu268 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.4

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

芳基酯酶F(ARSF)活性蛋白英文名稱(chēng)：Active Arylsulfatase F (ARSF)ASF物種：Human，人

法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1 (FDFT1)SQS; SS; Squalene Synthase; FPP farnesyltransferase物種：Human,，人

外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 1 (ENPP1)M6S1; NPP1; NPPS; PC-1; PCA1; PDNP1; Membrane component chromosome 6 surface marker 1; Alkaline phosphodiesterase I; Plasma-cell membrane glycoprotein PC-1物種：Rat,，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii酒假絲酵母 Candida kefyr

棓酯（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Propyl gallate

 Super-Bradford蛋白定量試劑盒豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

美扎（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：UV法溶出度檢查 Chlormezanone

 香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

磺二甲 （標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Sulfamethazine

 植物桿菌 Lactobacillus plantarumMN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元

氫鈣（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定 Calcium hydrogenphosphate dihydrate

 人胃細(xì)胞栗色渾圓鏈霉菌 Streptomyces castaneoglobosus

磺脒（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 Sulfaguanidine

 MDA-MB-231, 人腺細(xì)胞人膽囊細(xì)胞

布芬（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Fenbufen

 地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 Troxerutin

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum貝葉多孔菌

二羥（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Diprophylline

Ⅲ組磷脂酶A2(PLA2G3)重組蛋白大鼠硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基（含瓊脂） Silicate Bacteria Medium 250g

人鋅指蛋白RIZ(PRDM2)免疫試劑盒

培養(yǎng)基Q Medium Q (Columbia agar) 250g

30次 DNA PAGE膠回收試劑盒 PAGE DNABACK 4℃保存

50T 紅薯內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

2 ug pMXmKate(650) pMXmKate(650) 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

大鼠血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

大鼠抗抗體(AsAb)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人魚(yú)1(PRM1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

PPLO肉湯 PPLO Broth 250g

1瓶 CW-2細(xì)胞株 CW-2 低溫運(yùn)輸和保存