蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant 5'-3'Exoribonuclease 1 (XRN1)

SEP1; Exoribonuclease I; Strand-exchange protein 1 homolog

型號(hào)：GOY-01D2444

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：37.4kDa

實(shí)際分子量：37kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Tyr1394~Glu1706 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：9.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白英文名稱：Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)EL; EDL; Endothelial Lipase; Endothelial cell-derived lipase物種：Mouse,，小鼠

周期素依賴性激酶6(CDK6)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 6 (CDK6)PLSTIRE; Cell division protein kinase 6; Serine/threonine-protein kinase PLSTIRE物種：Human，人

透明質(zhì)酸合酶2(HAS2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Hyaluronan Synthase 2 (HAS2)Hyaluronate synthase 2; Hyaluronic acid synthase 2物種：Rat,，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

涎沫假絲酵母 Candida zeylanoides曲霉屬 Aspergillus sp.

泛鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Sodium D-pantothenate

 香菇 Lentinula edodes地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

尼達(dá)尼布,；BIBF 1120 質(zhì)量規(guī)格：三重血管激酶抑制劑 Nintedanib (BIBF1120)

 特異青霉(點(diǎn)青霉) Penicillium notatumNCI-H1299(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)

麥芽糖（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 D-(+)-Maltose monohydrate

 4T1(小鼠腺細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

核黃素鈉混合物（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn) Riboflavin-5-phosphate sodium

 苜蓿中華根瘤菌炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

尿素（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Urea

 rEPC,，大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞-骨髓費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定 D-Biotin

 屎腸球菌 Enterococcus faeciumKG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞)

定（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Terfenadine

 苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

定 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Terfenadine

5'-3'外切核糖核酸酶1(XRN1)重組蛋白人豬戊糖素(PE)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

10mL 硫酸卡那溶液,50mg/mL Kanamycin Sulfate Solution -20 ℃避光保存

Boldenone(寶丹酮)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

大鼠肥大細(xì)胞類胰蛋白(MCT)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

2 ug pSC194 pSC194 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

50T 溶血性鏈球菌熒光PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

小鼠血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒

2 ug pTracer EF/V5-His A pTracer EF/V5-His A 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

1g 對(duì)鈉鹽 p-Nitrophenylphosphate Disodium Salt Hexahydrate（p-NPP） -20℃保存

10mL DNA堿性膠上樣液,6× DNAoN for Alkaline Gel -20℃保存