蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Calpain 9 (CAPN9)

GC36; nCL4; Novel Calpain Large Subunit-4; Digestive tract-specific calpain; New calpain 4

型號：GOY-01D2371

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：37.4kDa

實(shí)際分子量：37kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu42~Ala340 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

單脫氨酶2(AMPD2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Adenosine Monophosphate Deaminase 2 (AMPD2)AMPD Isoform L物種：Mouse,，小鼠

磷酸鹽胞苷轉(zhuǎn)移酶1β(PCYT1b)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phosphate Cytidylyltransferase 1, Choline Beta (PCYT1b)CTB; CCTB; CCT-beta; Phosphorylcholine transferase B; CTP:phosphocholine cytidylyltransferase B物種：Mouse，小鼠

前列腺素I合酶(PTGIS)重組蛋白英文名稱：Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS)PGIS; CYP8A1; Prostacyclin Synthase; Prostacycline Synthetase; Prostagladin I2 Synthetase; PGI2 Synthetase; Cytochrome P450,Family 8,Subfamily A,Polypeptide 1物種：Human,，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

皺枝孢 Cladosporium delicatulum熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

三葉豆紫檀苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Trifolirhizin

 家貓肺成纖維樣細(xì)胞小鼠腺腫瘤細(xì)胞

桑皮苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Mulberroside A

 異常畢赤酵母 Pichia anomala球擬圓酵母 Torulopsis globosa

沙苑子苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Complanatoside A

 小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞（EGFP標(biāo)記）大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)基

桑色素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Morin

 豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

山梔苷甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Shanzhiside methylester

 HLF-a(人肺細(xì)胞)MADB106(大鼠腺細(xì)胞)

商陸皂苷甲(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Esculentoside A

 瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

芍藥內(nèi)酯苷(標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥96.50%，標(biāo)準(zhǔn)品 Alibiflorin

 刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida

蛇床子素（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Osthole

鈣蛋白酶9(CAPN9)重組蛋白人液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 Thiolglycollate Medium 250g

1瓶 H4-II-E-C3細(xì)胞株 H4-II-E-C3 低溫運(yùn)輸和保存

2 ug pET-28a(+) pET-28a(+) 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

1瓶 HCT-116細(xì)胞株 HCT-116 低溫運(yùn)輸和保存

大鼠白介素32(IL-32)免疫試劑盒

魚腎上腺素(EPI)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1000mL SSC,20X  SSC,20X  常溫保存

2×YT肉湯 2×YT Broth 250g

2 ug pYRP7 pYRP7 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

沙氏葡萄糖瓊脂 Sabouraud’s Glucose Agar 250g