蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過(guò)親和，離子交換,，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Dystrophia Myotonica Protein Kinase (DMPK)

DM; DM1; DM1PK; DMK; MDPK; MT-PK; Myotonic Dystrophy Protein Kinase; Myotonin-Protein Kinase; Dystrophia Myotonica 1; Thymopoietin Homolog

型號(hào)：GOY-01D2346

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：27.1kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Met1~Ile201 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

組織K(CTSK)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X物種：Rabbit，兔

腺苷酸激酶3(AK3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Adenylate Kinase 3 (AK3)AK3L1; AK6; AKL3L; Adenylate Kinase 3 Alpha-Like 1; GTP:AMP Phosphotransferase AK3, Mitochondrial物種：Human,，人

核糖核酸酶T2(RNASET2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ribonuclease T2 (RNASET2)Rnase-T2; RNASE6PL; RNASE6-PL; Ribonuclease 6物種：Mouse,，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii

絞股藍(lán)皂苷XLIX(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Gypenoside XLIX

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae香菇 Lentinula edodes

YM-201636 質(zhì)量規(guī)格：>98%,PIKfyve抑制劑 YM201636

 MV3(人黑色素瘤細(xì)胞)無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum

金絲桃苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Hyperoside

 豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaBCIP/NBT KitBCIP/NBT堿性酶顯色試劑盒

金石蠶苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Poliumoside

 植物桿菌 Lactobacillus plantarum根瘤菌

京尼平(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Genipin

 藍(lán)綠小四孢菌 Microtetraspora cyaneoviridisSP Mouse HRP Kit/鼠Streptavidin-HRP試劑盒

阿非迪,；艾菲地可寧 質(zhì)量規(guī)格：>98%,美國(guó)進(jìn)口 Aphidicolin from Nigrospora oryzae

 大鼠肝星狀細(xì)胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

京尼平 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Genipin

 青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolescentis香菇 Lentinula edodes

桔梗皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Platycodin D

肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良蛋白激酶(DMPK)重組蛋白人人P2蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

100g DEAE 纖維素 DEAE Cellulose 室溫干燥保存

貓生長(zhǎng)激素(GH)免疫試劑盒

50T 多瘤病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

2 ug pAc5.1B-EGFP pAc5.1B-EGFP 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH8.5  Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH8.5  常溫保存

5mL 藍(lán)膠瓊脂糖 Cibacron Blue Agarose 4℃保存

人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH7.0  Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.0  常溫保存

50次 柱式質(zhì)粒 DNAout Column Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)

10g N-2-  -N’-3- 丙磺酸 HEPPS 室溫避光保存