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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-17 11:41:47瀏覽次數(shù):146次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D2127 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (AS |
物種 | Homo sapiens (Human,,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
法尼基二磷酸合酶(FDPS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Farnesyl Diphosphate Synthase (FDPS)FPS; Farnesyl Pyrophosphate Synthetase; Dimethylallyltranstransferase; Geranyltranstransferase物種:Human,人
鈣調(diào)磷酸酶(CaN)重組蛋白英文名稱:Recombinant Calcineurin (CaN)PPP3CA; PPP3-CA; CCN1; CNA1; CALN; CALNA1; PP2B; PP2-B; Protein Phosphatase 3(formerly 2B),Catalytic Subunit,Alpha Isoformprotein Phosphatase 2B; Calcineurin A Alpha物種:Human,,人
泛素結(jié)合酶E2C結(jié)合蛋白E2I(UBE2I)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ubiquitin Conjugating Enzyme E2I (UBE2I)P18; UBC9; UBCE9; SUMO-protein ligase; Ubiquitin carrier protein 9; Ubiquitin carrier protein I; Ubiquitin-protein ligase I; SUMO-conjugating enzyme UBC9物種:Human,,人
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,,人) | GOY-01D2127 |
英文名稱:Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2)
HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase
型號(hào):GOY-01D2127
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 分泌, 高爾基體
預(yù)測(cè)分子量:50.4kDa
實(shí)際分子量:21&40&56kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ala451~Ile780 with Two N-terminal Tags, His-tag and SUMO-tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):6.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus植物桿菌 Lactobacillus plantarum
N-乙酰-L-氨 質(zhì)量規(guī)格:98%,BR Ac-Ala-OH
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes尖頂羊肚菌 Morchella conica
N-乙酰-D-氨 質(zhì)量規(guī)格:98%,BR N-Acetyl-D-alanine
5637(人膀胱細(xì)胞)QGY-7701, 人肝細(xì)胞
N-乙酰-L-酪氨 質(zhì)量規(guī)格:0.98 N-Acetyl-L-Tyrosine
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum人小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基
N-乙酰-L-谷氨酰 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR N-Acetyl-L-Glutamine
泡盛曲霉 Aspergillus awamori地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
甲基橙(生物染色) 質(zhì)量規(guī)格:BS Methyl orange
百脈根根瘤菌 Rhizobium loti大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
分散橙13 質(zhì)量規(guī)格:90%,,進(jìn)口分包 Disperse Orange 13
P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)CaES-17(人食管細(xì)胞)
性橙74 質(zhì)量規(guī)格:>85% Acid Orange 74
正灰綠正青霉 Eupenicillium euglaucum爪哇根霉 Rhizopus javanicus
煌橙,藏花橙G 質(zhì)量規(guī)格:BS Crocein Orange G
N-?;拾贝减0匪饷?(ASAH2)重組蛋白人CVT瓊脂 CVT Agar 250g
植物玉米素核苷(ZR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
人神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
2 ug pQE-80L pQE-80L 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
大鼠鈣調(diào)(CaN)免疫試劑盒
小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)免疫試劑盒
兔纖溶抑制因子(TAFI)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
5mg 衣 Tunicamycin 4℃保存
15mL Hematoxylin Staining Solution 室溫保存
2 ug pCAMBIA1305.2 pCAMBIA1305.2 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存
人沙眼衣原體抗原(CT)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
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