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磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人

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更新時間:2023-03-17 10:35:19瀏覽次數(shù):299次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2066 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Phosphodiesterase 5A, cGMP Specific (P
物種 Homo sapiens (Human,人)
磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:細(xì)胞角蛋白15抗體 英文名稱:CK15 0.1ml細(xì)胞角蛋白14抗體 英文名稱:CK14+17+42+10 0.1ml促胃泌素受體抗體 英文名稱:CCKBR 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

透明質(zhì)酸氨基葡糖苷酶1(HYAL1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hyaluronoglucosaminidase 1 (HYAL1)LUCA1; NAT6; Hyaluronidase-1; Lung carcinoma protein 1物種:Mouse,,小鼠

肝脂酶(LIPC)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)HL; HTGL; Hepatic Lipase; Hepatic triacylglycerol lipase; Lipase member C物種:Mouse,,小鼠

解整合素金屬12(ADAM12)重組蛋白英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 12 (ADAM12)MCMP; MCMPMltna; MLTN; MLTNA; Meltrin Alpha; Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12物種:Human,,人

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,,人)

GOY-01D2066

 

 

英文名稱:Recombinant Phosphodiesterase 5A, cGMP Specific (PDE5A)

CGB-PDE; cGMP-binding cGMP-specific phosphodiesterase; cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase

型號:GOY-01D2066

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:41.3kDa

實際分子量:42kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Glu536~Gln860 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 80%

等電點:6.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品:

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞英文名稱:BHK-21

長春堿 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR Vinblastine Sulfate

 人結(jié)腸長春新堿耐藥株英文名稱:HCT-8/V?

長春堿(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Vinblastine Sulfate

 克雷伯氏顯色培養(yǎng)基250克國產(chǎn)/進(jìn)口

替莫唑 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Temozolomide

 四鈉亮綠增菌液/四鹽煌綠增菌液基礎(chǔ)/TTB沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

長春堿(進(jìn)分) 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分Sigma V1377 Vinblastine Sulfate

 UVM添加劑/UVM Supplement添加到HB4195中,用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)10毫升國產(chǎn)/進(jìn)口

替莫唑(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Temozolomide

 3.5%鈉三糖鐵/3.5% NaC1 TSI Agar副溶血弧菌生化試驗鑒別250克國產(chǎn)/進(jìn)口

 質(zhì)量規(guī)格:>99%,,USP30,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Aminoglutethimide

 人視網(wǎng)膜muller細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Aminoglutethimide

 小鼠子宮平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

氟他 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP29 Flutamide

磷酸二酯酶5A(PDE5A)重組蛋白人P0蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒

大鼠α-輔肌動蛋白1(ACTN-1)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

1瓶 CHL細(xì)胞株 CHL 低溫運輸和保存

2 ug pMAL-p5E pMAL-p5E 低溫運輸,,-20℃保存

小鼠白介素25(IL25/C19orf10)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pmCherry-GFP-LC3 pmCherry-GFP-LC3 低溫運輸,,-20℃保存

50T 溶血性鏈球菌ACR檢測試劑盒  低溫運輸,,-20℃保存

MiddleBrook7H10瓊脂 MiddleBrook7H10 Agar 250g

0.1mL 綠如藍(lán)染料,PCR級 DNAGREEN, PCR Grade -20℃保存

人血小板激活因子乙酰水解2,,細(xì)胞質(zhì)(PAFAH2)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

2000 U 限制性內(nèi)切BamHI Restriction Endonuclease -20℃保存

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