蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過(guò)親和,，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Protein O-Fucosyltransferase 1 (POFUT1)

O-FUT; O-Fuc-T; FUT12; GDP-Fucose Protein O-Fucosyltransferase 1; Peptide-O-fucosyltransferase 1

型號(hào)：GOY-01D2319

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：20.6kDa

實(shí)際分子量：21kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：His238~Phe388 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：8.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

β-1,4-N-乙酰半乳糖胺基轉(zhuǎn)移酶2(b4GALNT2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Beta-1,4-N-Acetyl Galactosaminyl Transferase 2 (b4GALNT2)SD; B4GALGT2; B4GALT; Cad; GALGT2; Sda; Sd(a) beta-1,4-GalNAc transferase; UDP-GalNAc:Neu5Aca2-3Galb-R b1,4-N-acetylgalactosaminyltransferase物種：Human,，人

酯酶D(ESD)重組蛋白英文名稱：Recombinant Esterase D (ESD)FGH; S-formylglutathione hydrolase; Methylumbelliferyl-acetate deacetylase物種：Mouse，小鼠

β-1,3-N-乙酰葡糖胺基轉(zhuǎn)移酶Manic Fringe(MFNG)重組蛋白英文名稱：Recombinant Beta-1,3-N-Acetylglucosaminyltransferase Manic Fringe (MFNG)MFNG O-Fucosylpeptide 3-Beta-N-Acetylglucosaminyltransferase物種：Human,，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

293ET(人胚腎細(xì)胞（SV40T和EBNA1基因修飾細(xì)胞）)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

朝藿定C（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Epmedin C

 藤黃微球菌 Micrococcus luteusWISH(人羊膜細(xì)胞)

橙黃決明素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Aurantio-obtusin

 RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞)中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥90%,BR Hesperidin

 苜蓿中華根瘤菌炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

(標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Hesperidin

 嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilusJurkat/人外周血白血病T細(xì)胞

橙皮素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Hesperitin

 綠色木霉 Trichoderma viride釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

蟲(chóng)草素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Cordycepin

 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞鏈霉菌 Streptomyces sp.

川陳皮素;蜜橘黃素 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR Nobiletin

 rCF, 大鼠心臟成纖維細(xì)胞貂肺上皮細(xì)胞

川陳皮素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Nobiletin

蛋白O-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶1(POFUT1)重組蛋白人1瓶 SH3細(xì)胞株 SH3 低溫運(yùn)輸和保存

100µL 小鼠抗c-Myc標(biāo)簽單抗 Anti c-Myc-Tag Mouse MAb -20℃保存

兔中性粒細(xì)胞明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛主要組織相容性復(fù)合體(MHC/BoLA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

2 ug pCAMBIA1405.1 pCAMBIA1405.1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1瓶 JAR細(xì)胞株 JAR 低溫運(yùn)輸和保存

豬Tau蛋白免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

雞的牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

10uL HRP標(biāo)記的抗抗體 Anti Biotin Ab,HRP 4℃保存