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磷酸甘露糖酶1(PMM1)重組蛋白人

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更新時間:2023-03-17 09:39:53瀏覽次數(shù):257次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2277 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant Phosphomannomutase 1 (PMM1)
物種 Homo sapiens (Human,,人)
磷酸甘露糖酶1(PMM1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 英文名稱:Phospho-CEBP beta (Ser105) 0.1ml磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 英文名稱:Phospho-CEBP beta (Thr235) 0.1ml磷酸化CD19抗體 英文名稱:Phospho-CD19 (Tyr531) 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

酪氨酰DNA磷酸二酯酶1(TDP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tyrosyl DNA Phosphodiesterase 1 (TDP1)SCAN1; Tyr-DNA phosphodiesterase 1物種:Rat,大鼠

基質(zhì)金屬2(MMP2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2)CLG4; CLG4A; MMP-II; MONA; TBE-1; PEX; Gelatinase A; 72kDa Gelatinase; 72kDa Type IV Collagenase物種:Human,人

脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅱ(P4Ha2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide II (P4Ha2)Procollagen-Proline,2-Oxoglutarate 4-Dioxygenase(Proline 4-Hydroxylase),Alpha Polypeptide II物種:Human,,人

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

磷酸甘露糖酶1(PMM1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,,人)

GOY-01D2277

 

 

英文名稱:Recombinant Phosphomannomutase 1 (PMM1)

Sec53; PMMH-22; Brain Glucose-1,6-Bisphosphatase

型號:GOY-01D2277

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:33.3kDa

實際分子量:38kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ala2~Ala262 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:5.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。

操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品:

Caco-2(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)束叢鏈霉菌 Streptomyces fasciculus

常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷甲 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Kalopanaxsaponin H

 爪哇根霉 Rhizopus javanicus人非小細(xì)胞肺細(xì)胞

V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Lup-20(29)-en-28-oic acid, 3-[β-D-glucopyranosyl(1→4)[a-L-rhamnopyranosyl) (1→2)-a -L-arabinopyranosyl]oxy], (3β,4a)-)

 CTLL-2(小鼠T細(xì)胞)貝葉多孔菌

GDC0994 質(zhì)量規(guī)格:ERK1/2 抑制劑 GDC-0994

 惡臭假單胞菌 Pseudomonas putida葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

V 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Hederagenin 3-O-α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-(β-D-glucopyranosyl(1→4))-α-L-arabinopyranoside

 戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus小檗堿

氨三乙 質(zhì)量規(guī)格:AR Nitrilotriacetic acid

 鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

靈芝I(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ganoderic acid I

 Western Blot封閉液Ⅰ(BSA,pH7.5)/Blocking Buffer(BSA)異常漢遜酵母 Hansenula anomala

苦蘇花皂苷C 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Cussosaponin C

 暫無 Brevibacterium thiogenitalis涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

常春藤苷C 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,,標(biāo)準(zhǔn)品 Hederacoside C

磷酸甘露糖酶1(PMM1)重組蛋白人1g 3,3’- 二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸 DAB HCl -20℃保存

5g 2,5- 二苯基惡唑 2,5-Diphenyloxazole(PPO) 室溫保存

牛免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

500mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.2M,pH8.5  Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.5  常溫保存

羊環(huán)腺苷(cAMP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝

1瓶 THLE-3細(xì)胞株 THLE-3 低溫運(yùn)輸和保存

人血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

小鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP2/Gel A)抗體免疫試劑盒

2 ug pBAD/gIII C pBAD/gIII C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

 


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