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DNA指導(dǎo)聚合酶α1(POLa1)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-17 09:24:58瀏覽次數(shù):233次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D2254 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Polymerase DNA Directed Alpha 1 (POLa1
物種 Homo sapiens (Human,,人)
DNA指導(dǎo)聚合酶α1(POLa1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:CD105抗體 英文名稱:CD105 0.1ml干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原抗體 英文名稱:c-Kit 0.1ml細(xì)胞角蛋白5抗體 英文名稱:Cytokeratin 5 0.1ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

DNA指導(dǎo)聚合酶α1(POLa1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,,人)

GOY-01D2254

 

 

英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Alpha 1 (POLa1)

POLA; p180; DNA polymerase alpha catalytic subunit p180

型號(hào):GOY-01D2254

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:29.5kDa

實(shí)際分子量:32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly1240~Ser1462 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):7.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

小亞基鈣1(CAPNS1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Calpain, Small Subunit 1 (CAPNS1)CANP; 30K; Calpain 4; CANPS; CAPN4; CDPS; Calcium-activated neutral proteinase small subunit; Calcium-dependent protease small subunit; Calpain regulatory subunit物種:Human,,人

DNA指導(dǎo)聚合酶δ1(POLd)重組蛋白英文名稱:Recombinant Polymerase DNA Directed Delta 1 (POLd)CDC2; POLD1; DNA polymerase subunit delta p125物種:Mouse,,小鼠

果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Aldolase A, Fructose Bisphosphate (ALDOA)FBA; ALDO-A; Fructose 1,6 Bisphosphate Aldolase; Lung cancer antigen NY-LU-1; Muscle-type aldolase物種:Rat,大鼠

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis小鼠白血病克隆細(xì)胞系

琥珀普卡必利 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Prucalopride Succinate

 黃色孢鏈霉菌 Streptomyces longisporoflavus腫瘤細(xì)胞

鹽納洛 質(zhì)量規(guī)格:>98%,二水合物,阿片類受體拮抗劑 Naloxone HCl dihydrate

 鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

NVP-BKM120 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的PI3K抑制劑 BKM120;NVPBKM120; Buparlisib)

 人呼吸道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica

硝布康唑 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Butoconazole nitrate

 中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiMDA-MB-231(人腺細(xì)胞)

NHS-biotin;琥珀酰亞酯  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR NHS-biotin

 USMC(大鼠血管平滑肌細(xì)胞)泡盛曲霉 Aspergillus awamori

(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rebeprazole sodium

 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica布魯塞爾德克酵母 Dekkera bruxellensis

 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR Rebeprazole sodium

 串珠鐮孢 Fusarium moniliformehDPSCs, 人前磨牙牙髓干細(xì)胞

克肟 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Cefixime

DNA指導(dǎo)聚合酶α1(POLa1)重組蛋白人羊溶菌(LZM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

50T 呼吸道合胞病毒A組PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,,-20℃保存

CD10分子(CD10)免疫試劑盒

AK瓊脂(2號(hào)) AK Agar(No.2) 250g

大鼠11β羥類固醇脫氫1型(11β-HSD1)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

變形桿菌成套生化鑒定管(BXWS) BXWS 13種*1套/盒*10盒

1套 可逆性銅染試劑盒  

猴子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒

1瓶 SGC-7901/DDP細(xì)胞株 SGC-7901/DDP 低溫運(yùn)輸和保存

兔血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

100mg 秋水仙素 Colchicine 室溫避光保存

 


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