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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 基質(zhì)金屬蛋白酶20(MMP20)重組蛋白小鼠
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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-17 08:56:10瀏覽次數(shù):169次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D2228 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 20 (MMP20) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
基質(zhì)金屬蛋白酶20(MMP20)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | GOY-01D2228 |
英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 20 (MMP20)
Enamelysin; Enamel metalloproteinase
型號:GOY-01D2228
酶與激酶
血液病學(xué)
生殖科學(xué)
發(fā)育科學(xué)
物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌, 細胞外基質(zhì)
預(yù)測分子量:33.0KDa
實際分子量:33kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Val137~Tyr398 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:7.0
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
二-N-乙酰殼二糖酶(CTBS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Di-N-Acetyl Chitobiase (CTBS)CTB物種:Human,,人
內(nèi)切核酸酶G(ENDOG)重組蛋白英文名稱:Recombinant Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG)ENDO-G物種:Human,,人
鉬輔因子合成蛋白2(MOCS2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Molybdenum Cofactor Synthesis 2 (MOCS2)MCBPE; MOCO1; MOCS2A; MOCS2B; MPTS; Molybdenum cofactor synthesis protein 2 large subunit; Molybdopterin-synthase large subunit物種:Human,人
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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日本根霉 Rhizopus japonicus香菇 Lentinula edodes
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苜蓿中華根瘤菌屎腸球菌 Enterococcus faecium
BMN-673 質(zhì)量規(guī)格:>98% BMN673
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小鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)免疫試劑盒
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