蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant G Protein Coupled Receptor Kinase 4 (GRK4)

GPRK2L; GPRK4; GRK4a; IT11; G protein-coupled receptor kinase GRK4

型號：GOY-01D2203

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：33.8kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Phe187~Phe449 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

肝素-6-O-磺基轉(zhuǎn)移酶3(HS6ST3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Heparan Sulfate-6-O-Sulfotransferase 3 (HS6ST3)酶與激酶物種：Human,，人

拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(2)重組蛋白英文名稱：Recombinant oisomerase II (2)DNA oisomerase 2-alpha; DNA oisomerase II, alpha isozyme物種：Human,，人

組織A(CTSA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cathepsin A (CTSA)CTS-A; GLB2; GSL; NGBE; PPCA; PPGB; Protective Protein For Beta-Galactosidase; Galactosialidosis; Carboxypeptidase C; Carboxypeptidase L物種：Mouse,，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

香菇 Lentinula edodes雙孢蘑菇

銀椴苷,；椴樹苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Tiliroside

  正常細(xì)胞一步法Western專用封閉液

芫花素（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 4',5-Dihydroxy-7-methoxyflavone

 苜蓿中華根瘤菌植物桿菌 Lactobacillus plantarum

女貞苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Ligustroflavone

 植物桿菌 Lactobacillus plantarum小鼠胰腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

客西茄堿（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Khasianine

 QG-56(人肺扁平上皮細(xì)胞)紅色孢鏈霉菌 Streptomyces longispororuber

夏佛塔苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Schaftoside

 黑木耳 Auricularia auriculaHep-2, 人喉細(xì)胞系

二氫小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob

 L-Glutamine (100X)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桔紅素;桔皮素(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,，標(biāo)準(zhǔn)品 Tangeretin

 小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基武夷小單孢菌 Micromonospora wuyiensis

桔紅素;桔皮素 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR Tangeretin

G蛋白偶聯(lián)受體激酶4(GRK4)重組蛋白人1瓶 AMS2細(xì)胞株 AMS2 低溫運(yùn)輸和保存

1瓶 CCC-SMC-2細(xì)胞株 CCC-SMC-2 低溫運(yùn)輸和保存

人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)(PDI)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

10mL 鹽酸鹽溶液,100mg/mL Oxytetracycline HCl Solution  -20 ℃避光保存

人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)免疫試劑盒

2 ug pSV3neo pSV3neo 低溫運(yùn)輸,，-20℃保存

250mL Elution Buffer,pH8.0  Elution Buffer,pH8.0  常溫保存

大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)免疫試劑盒進(jìn)口,、分裝

2 ug SD1211- 1 SD1211- 1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100mL 電泳級甘油 Glycerol,，EG 常溫

小鼠毒蕈鹼乙酰受體M2(CHRM2)免疫試劑盒