蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Legumain (LGMN)

AEP; LGMN1; PRSC1; Protease,Cysteine 1; Asparaginyl endopeptidase

型號(hào)：GOY-01D1966

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：溶酶體

預(yù)測(cè)分子量：51.3KDa

實(shí)際分子量：51kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Val18~Tyr435 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：5.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

核苷酸還原酶M1(RRM1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ribonucleotide Reductase M1 (RRM1)R1; RIR1; RR1; Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit物種：Mouse,，小鼠

11-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD11b3)重組蛋白英文名稱：Recombinant 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD11b3)HSD11b1L; SCDR10; HSD3; SDR26C2; 11-Beta Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 Like Protein; Short chain dehydrogenase/reductase family 26C member 2物種：Human，人

羧酸酯酶3(CES3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carboxylesterase 3 (CES3)Br3; ES31; Brain carboxylesterase 3; Esterase 31; Liver carboxylesterase 31 homolog物種：Human,，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

發(fā)酵培養(yǎng)基 規(guī)格： 250g 用途： 用于鑒別發(fā)酵試驗(yàn)(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗(yàn)方法2007版)。

醋精氨加壓素 質(zhì)量規(guī)格：純度98% Argipressin Acetate

 NEL樣蛋白2(NELL2)重組蛋白英文名稱：Recombinant NEL Like Protein 2 (NELL2)

 質(zhì)量規(guī)格：純度大于98%,USPgrade Atenolol

 結(jié)合珠蛋白(Hpt)重組蛋白英文名稱：Recombinant Haptoglobin (Hpt)

鈣 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Atorvastatin calcium

 多巴受體D1(DRD1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Dopamine Receptor D1 (DRD1)

（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定,HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Atenolol

 糖原合酶激酶3α(GSK3α)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Atorvastatin calcium

 組織金屬抑制因子1(TIMP1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)

阿扎胞苷/5-雜胞核苷(進(jìn)分) 質(zhì)量規(guī)格：> 98%,進(jìn)分,Sigma A2385 Azacitidine (5-Azacytidine)

 NRK-52E(大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

5-胞苷/阿扎胞苷/5-雜胞核苷 質(zhì)量規(guī)格：純度> 98%,BR,，可用于細(xì)胞培養(yǎng) Azacitidine (5-Azacytidine)

 HHCC(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

5-胞苷/阿扎胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Azacitidine (5-Azacytidine)

天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白小鼠白淺灰鏈霉菌   產(chǎn)生新復(fù)合體,。

滅酵母   用于釀造白葡萄酒

嗜水氣單胞菌   

康寧木霉   

繩狀青霉   可制雙鏈RNA

酵母   酒精酵母

大禿馬勃   食用,，藥用止血

金龜子綠僵菌小孢變種   生物防治

固囊酵母   

糞鏈球菌   乳酸菌制劑

雪白根霉   產(chǎn)糖化酶

紅曲霉菌   

羅斯酵母