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鈣蛋白酶2(CAPN2)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-15 15:01:43瀏覽次數(shù):273次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D1955 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Calpain 2 (CAPN2)
物種 Homo sapiens (Human,人)
鈣蛋白酶2(CAPN2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化絲切蛋白抗體 英文名稱:Phospho-Cofilin (Tyr140) 0.1ml磷酸化絲切蛋白抗體 英文名稱:phospho-CFL1 (Tyr89) 0.1ml磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 英文名稱:Phospho-cdc25A (Ser178) 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

羧肽酶A4(CPA4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase A4 (CPA4)酶與激酶物種:Human,,人

巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶8(FUT8)重組蛋白英文名稱:Recombinant Fucosyltransferase 8 (FUT8)GDP-L-Fuc:N-acetyl-beta-D-glucosaminide alpha1,6-fucosyltransferase; Glycoprotein 6-alpha-L-fucosyltransferase; Alpha-(1,6)-fucosyltransferase物種:Mouse,,小鼠

核糖核酸酶A2(RNASE2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ribonuclease A2 (RNASE2)Rnase-A2; Rnase2; EDN; Ribonuclease US; Ribonuclease,RNase A Family,2; Liver,Eosinophil-Derived Neurotoxin; MNon-secretory ribonuclease物種:Rat,大鼠

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

鈣蛋白酶2(CAPN2)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,,人)

GOY-01D1955

 

 

英文名稱:Recombinant Calpain 2 (CAPN2)

CANPL2; CANPml; mCANP; Calpain-2 Catalytic Subunit; Calcium-activated neutral proteinase 2; Calpain M-type; Calpain large polypeptide L2; Millimolar-calpain; Calpain 2, Large Subunit

型號(hào):GOY-01D1955

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

神經(jīng)科學(xué)

胃腸病學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:57.4kDa

實(shí)際分子量:57kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Leu45~Asp514 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):5.0

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品:

細(xì)胞表面趨化因子受體2B抗體 CCR-2B 0.1ml

殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體 Cecropin monoclonal 1ml

唾液酸結(jié)合性免樣凝集素7抗體 CD328/Siglec-7 0.2ml

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 Phospho-CHK2 (Thr387) 0.1ml

鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體 CNR1/CB1 0.1ml

24羥化酶抗體 CYP46 0.2ml

C端結(jié)合蛋白1抗體 CTBP1 0.2ml

瞬時(shí)表達(dá)軸索糖蛋白1抗體 TAG1/CNTN2 0.1ml

磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 phospho-EGFR (Ser1142) 0.1ml

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 Phospho-MKP1 (Ser296 + Ser318) 0.1ml

脂肪酸延長(zhǎng)酶抗體 fatty acid elongase 1ml

心臟特異性同源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 0.2ml

鈣蛋白酶2(CAPN2)重組蛋白人脆弱擬桿菌   模式菌株,。質(zhì)量控制、藥敏試驗(yàn)菌株

熒光假單胞菌   assay of assimilable organic carbon AOC

吸水鏈霉菌奧薩亞種   模式菌株,,奧薩

乳酸片球菌   模式菌株

靈芝(紅芝,,赤芝)   甜芝、龍靈芝,。

大孢綠僵菌=金龜子綠僵菌大孢變種   生物防治用菌,。

釀酒酵母   清酒酵母

巧克力微桿菌   

硝基還原假單胞菌   

納地青霉   

粘質(zhì)   產(chǎn)幾丁質(zhì)酶

淡天藍(lán)色鏈霉菌   能防治煙草赤星病,,對(duì)陽(yáng)性細(xì)菌、大腸桿菌,、白色假絲酵母無(wú)作用,。

清酒酵母   作抗菌素效價(jià)測(cè)定指示菌。

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