蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和,，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant NADH Dehydrogenase 1 (ND1)

MT-ND1; MTND1; NAD1; NADH-ubiquinone oxidoreductase chain 1; Mitochondrially Encoded NADH Dehydrogenase 1

型號(hào)：GOY-01D1776

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4,，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

5'-核苷酸酶Ⅲ(NT5C3)重組蛋白英文名稱：Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic III (NT5C3)UMPH1; PSN1; PN-I; UMPH; P5'N-1; p36; cN-III; Pyrimidine 5'-nucleotidase 1; Uridine 5'-monophosphate hydrolase 1物種：Mouse,，小鼠

腺苷酸環(huán)化酶4(ADCY4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Adenylate Cyclase 4 (ADCY4)ATP pyrophosphate-lyase 4; Adenylate cyclase type IV物種：Mouse，小鼠

吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)活性蛋白英文名稱：Active Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO)CD107B; INDO; Indoleamine-Pyrrole 2,3 Dioxygenase物種：Human,，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化蛋白激酶3抗體 phospho-FER/TYK3(Tyr402) 0.1ml

γ氨基丁酸受體相關(guān)蛋白樣1抗體 GABARAPL1 0.2ml

錨定蛋白G抗體 Ankyrin G 0.2ml

FRMD4B蛋白抗體 FRMD4B 0.2ml

FCHSD1蛋白抗體 FCHSD1 0.2ml

神經(jīng)元素1抗體 NGN1/Neurogenin 1 0.2ml

磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 phospho-ATF2 (Thr55) 0.1ml

MAWD結(jié)合蛋白抗體 PBLD/MAWBP 0.2ml

環(huán)指蛋白105抗體 TTC3/RNF105 0.2ml

環(huán)指蛋白165抗體 RNF165 0.2ml

細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白6抗體 CNOT6 0.2ml

9號(hào)染色體開放閱讀框150抗體 C9orf150 0.2ml

NADH脫氫酶1(ND1)重組蛋白大鼠Eupatilin 異澤蘭黃素22368-21-420mg

Sephadex LH-20 葡聚糖凝膠LH-2025g瓶

1640 培養(yǎng)基10×1L盒

HC基礎(chǔ)/HC Agar Base化妝品中霉菌總數(shù)測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口

人睪支持細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

3.5% NaC1氨基酸脫羧酶對照發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

胰蛋白胨水肉湯/Tryptone Broth靛基質(zhì)試驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

Artesunate 琥酯88495-63-020mg

Solar Fluor 488（效果同Alexa Fluor 488）琥珀酰亞胺酯1 mg支

優(yōu)級胎牛血清200ml瓶

足突蛋白(PDCN)重組蛋白英文名稱：Recombinant Podocin (PDCN)

Molt-4(人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

尿皮質(zhì)素1(UCN1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Urocortin 1 (UCN1)