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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-15 13:53:17瀏覽次數(shù):199次
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貨號(hào) | GOY-01D1763 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant N-Acetyltransferase 8 Like Protein (NA |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)DCDC3A; DCLK; DCAMKL1; Doublecortin And CaM Kinase-Like 1; Doublecortin domain-containing protein 3A; Doublecortin-like and CAM kinase-like 1物種:Mouse,小鼠
墨蝶呤還原酶(SPR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Sepiapterin Reductase (SPR)SDR38C1; 7,8-Dihydrobiopterin:NADP+ Oxidoreductase; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 38C,Member 1物種:Mouse,,小鼠
核糖核酸酶H2亞基A(RNASEH2A)重組蛋白英文名稱:Recombinant Ribonuclease H2 Subunit A (RNASEH2A)Rnase-H2A; RNASEHI; RNHIA; RNHL; AGS4; Ribonuclease H2,Large Subunit; Aicardi-Goutieres Syndrome 4; Ribonuclease HI large subunit物種:Rat,大鼠
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8樣蛋白(NAT8L)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,,人) | GOY-01D1763 |
英文名稱:Recombinant N-Acetyltransferase 8 Like Protein (NAT8L)
Hcml3; CML3; NAA synthetase; N-acetylaspartate synthetase; Camello-like protein 3
型號(hào):GOY-01D1763
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:36.5kDa
實(shí)際分子量:40kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Met1~Glu302 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):9.1
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上,。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
G蛋白偶聯(lián)受體48抗體 LGR4/GPR48 0.1ml
多糖核心蛋白抗體 SRGN/Chondroitin sulfate proteoglycan core protein 0.2ml
人原γ鏈抗體 Fibrinogen gamma chain 0.2ml
干擾素α受體2抗體 IFNAR2/IFNABR 0.2ml
層粘連蛋白1+2抗體 Laminin 1+2 0.1ml
鋅指蛋白437抗體 ZBTB2 0.2ml
磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 phospho-IKKi/IKKe(Thr500) 0.1ml
腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗體 AMPK gamma 1 0.2ml
磷酸化/蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗體 phospho-CK II beta(Ser209) 0.1ml
凝集蛋白家族10抗體(肝) COLEC10(liver) 0.2ml
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體 CCDC47 0.2ml
FRMD3蛋白抗體 FRMD3 0.2ml
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶8樣蛋白(NAT8L)重組蛋白人一抗稀釋液50ml瓶
Pyrogallol 焦性沒(méi)食子酸 (鄰三酚)100g瓶
α-MEM500ml瓶
EGTA 乙二醇-雙-(2-氨基乙)四乙酸10g瓶
Casein Enzymatic Hydrolysate 酶水解酪素100g瓶
2-Hydroxy-4-methoxybenzaldehyde 4-甲氧基673-22-320mg
50×Denhardts 溶液50ml瓶
透析袋MD25(7000D )5M卷
孕馬血清促(PMSG)1 000u-支 5支-盒盒
Polygalaxanthone III 遠(yuǎn)志山酮III162857-78-520mg
結(jié)晶紫染色液(1%)100ml瓶
Geniposidic acid 京尼平苷酸27741-01-120mg
Azithromycin 阿奇5g瓶
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