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S-期激酶關(guān)聯(lián)蛋白1(SKP1)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-13 15:20:00瀏覽次數(shù):216次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D1584 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant S-Phase Kinase Associated Protein 1 (S
物種 Homo sapiens (Human,,人)
S-期激酶關(guān)聯(lián)蛋白1(SKP1)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:7號(hào)染色體開放閱讀框63抗體 英文名稱:C7orf63 0.2mlCD2結(jié)合蛋白3抗體 英文名稱:CD2BP3 0.2ml20號(hào)染色體開放閱讀框72抗體 英文名稱:c20orf72 0.2ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

S-期激酶關(guān)聯(lián)蛋白1(SKP1)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D1584

 

 

英文名稱:Recombinant S-Phase Kinase Associated Protein 1 (SKP1)

SKP1A; EMC19; OCP-II; OCP2; TCEB1L; p19A; Cyclin-A/CDK2-associated p19; RNA polymerase II elongation factor-like protein; Transcription elongation factor B polypeptide 1-like

型號(hào):GOY-01D1584

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:22.4KDa

實(shí)際分子量:26kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Met1~Lys163 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):4.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

-胡蘿卜素-15,15'-單加氧酶1(bCMO1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Beta-Carotene-15,15'-Monooxygenase 1 (bCMO1)BCO1; BCDO; BCDO1; BCMO; Beta-carotene dioxygenase 1; Beta-carotene oxygenase 1; Beta,beta-carotene 15,15'-monooxygenase物種:Human,人

?;姿崦?/span>1(ACYP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Acylphosphatase 1, Erythrocyte (ACYP1)ACYPE; Acylphosphatase, erythrocyte isozyme; Acylphosphatase, organ-common type isozyme; Acylphosphate phosphohydrolase 1物種:Human,,人

核糖核酸酶A2(RNASE2)卵白蛋白偶聯(lián)物英文名稱:OVA Conjugated Ribonuclease A2 (RNASE2)Rnase-A2; Rnase2; EDN; Ribonuclease US; Ribonuclease,RNase A Family,2; Liver,Eosinophil-Derived Neurotoxin; MNon-secretory ribonuclease物種:Human,人

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品:

甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體 COPS2/TRIP15 0.2ml

尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體 CDX2/3 0.2ml

PSMα1+2+3+5+6+7抗體 Proteasome 20S alpha 1+2+3+5+6+7 0.2ml

磷酸化活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體 phospho-NFAT5 (Ser1197) 0.1ml

13號(hào)染色體開放閱讀框38抗體 C13orf38/LOC728591 0.2ml

1號(hào)染色體開放閱讀框57抗體 C1orf157 0.2ml

過氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 C20orf111 0.2ml

新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體 SCUBE1 0.2ml

醛糖還原酶抗體 AKR1B1 0.2ml

連接蛋白JPH3抗體 Junchilin 3 0.2ml

突觸細(xì)胞粘附分子3抗體 Neuroligin 3 0.2ml

鈣離子ATP酶通道蛋白抗體 ATP2c1 0.2ml

S-期激酶關(guān)聯(lián)蛋白1(SKP1)重組蛋白人Adenosine triphosphate 腺苷-5'-三磷酸1g瓶

CollagenaseⅤ 膠原酶Ⅴ100mg支

Calcium phytate 植酸鈣25g瓶

Prunin 櫻桃甙-洋李甙529-55-55mg

普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain,,核固紅法)2×100ml瓶

水飽和酚250ml瓶

孵育盒 (避光)29×19×4cm個(gè)

蘇木素規(guī)染色液500ml瓶

Ethyl methyl sulfonate 酸乙酯(EMS)10g瓶

Acridine Orange 吖啶橙1g瓶

Crocin I 西紅花苷I94238-00-320mg

Coenzyme Q10 輔酶Q10-范醌1g瓶

Sudan I I842-07-920mg

 


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