蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告,。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達90%以上,。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group V (PLA2G5)

PLA2-10; Calcium-dependent phospholipase A2; Group V phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 5

型號：GOY-01D1558

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：17.3kDa

實際分子量：17kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Gly21~Ser138 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 80%

等電點：8.4

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

基質金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1物種：Rat,，大鼠

脂肪酸去飽和酶1(FADS1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Fatty Acid Desaturase 1 (FADS1)D5D; FADS6; FADSD5; LLCDL1; TU12; Delta-5 Desaturase; Delta(5) fatty acid desaturase物種：Rat，大鼠

胱天8關聯(lián)蛋白2(CASP8AP2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Caspase 8 Associated Protein 2 (CASP8AP2)CED-4; FLASH; RIP25; FLICE-Associated Huge Protein物種：Rat,，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后,，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

公司正在出售的產品：

卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1抗體 MLF1 Interacting Protein/PBIP1/KLIP 0.1ml

磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 phospho-Crkl(Tyr244) 0.1ml

胱抑素A/半抑制劑A抗體 Cystatin A 0.2ml

凋亡相關蛋白激酶2抗體 DAPK2 0.1ml

外胚層發(fā)育不良抗體 ED-1 0.1ml

粘著斑激酶抗體 FAK/PTK2 0.1ml

紅細胞生成素抗體 EPO 0.1ml

14-3-3蛋白抗體 14-3-3(Alpha/Beta/Gamma/Delta/Epsilon) 0.1ml

Notch轉錄調控蛋白RBPJK抗體 RBPJK/RBP-J 0.2ml

小鼠抗表皮生長因子抗體 EGF 0.1ml

7抗體 Factor VII 0.1ml

脂肪細胞特異性粘附分子抗體 ASAM/ACAM 0.1ml

Ⅴ組磷脂酶A2(PLA2G5)重組蛋白人小鼠卵巢上皮細胞培養(yǎng)基100mL

改良Y培養(yǎng)基/Y Medium Modified分離小腸結腸炎耶爾森氏菌250克國產/進口

肝細胞HBV病毒株英文名稱：HEPG2.2.15

BEL-7404(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

補體成分2(C2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Complement Component 2 (C2)

叉框蛋白O3(FOXO3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Forkhead Box Protein O3 (FOXO3)

小鼠胰腺上皮細胞培養(yǎng)基100mL

Calu-3(人肺腺細胞)5×106cells/瓶×2

促腎上皮質激素釋放激素(CRH)重組蛋白英文名稱：Recombinant Corticotropin Releasing Hormone (CRH)

小鼠腸動脈內皮細胞培養(yǎng)基100mL

哥倫比亞培養(yǎng)基/Columbia Agar Medium營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)基及溶血試驗，梭菌的檢測250克國產/進口

胰腺腺英文名稱：Panc10.05

人腺細胞英文名稱：MDA-MB-231