蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ribonuclease A2 (RNASE2)

Rnase-A2; Rnase2; EDN; Ribonuclease US; Ribonuclease,RNase A Family,2; Liver,Eosinophil-Derived Neurotoxin; MNon-secretory ribonuclease

型號(hào)：GOY-01D1524

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：溶酶體, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：29.2kDa

實(shí)際分子量：32kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys28~Ile161 with Two N-terminal Tags, His-tag and SUMO-tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：9.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白英文名稱：Native Carbonic Anhydrase II (CA2)CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C物種：Simian,，恒河猴

體亞基α5(PSMa5)重組蛋白英文名稱：Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 5 (PSMa5)PSC5; Macropain zeta chain; Multicatalytic endopeptidase complex zeta chain; Proteasome zeta chain物種：Human,，人

葡萄糖激酶(GCK)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glucokinase (GCK)GK; GLK; HHF3; HK4; HKIV; HXKP; MODY2; Hexokinase-D; Hexokinase 4; Maturity Onset Diabetes Of The Young 2物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Bcl-2樣蛋白2抗體 Bcl2L2/BCL W 0.1ml

蛋白激酶ATK抗體 BTK/ATK 0.2ml

磷酸化原癌蛋白CBL2抗體 phospho-CBL2(Tyr731) 0.1ml

CD229抗體 CD229/SLAMF3 0.2ml

CD68抗體 CD68 0.1ml

細(xì)胞角蛋白10抗體 CK10 0.1ml

抗菌肽/天蠶素抗體 Cecropin 0.2ml

SLAMF7抗體 SLAMF7/CD319 0.2ml

周期素G抗體 Cyclin G 0.1ml

防御素β2抗體 Defensin β2 0.1ml

嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白抗體 ECP 0.1ml

磷酸化蛋白激酶A2受體抗體 Phospho-EphA2(Tyr594) 0.1ml

核糖核酸酶A2(RNASE2)重組蛋白人Formamide 甲酰胺100ml瓶

Recibufogenin 酯蟾毒配基465-39-420mg

Masson三色染色試劑盒7×100ml瓶

40%丙烯酰胺(19:1)500ml瓶

5ml注射器 國產(chǎn)1支袋

兔抗牛IgG-HRP0.1ml支

纖維素膜(NC)15cm×20cm張

Bis Benzlimide Hoechst NO33342 熒光染料25mg瓶

Cryptotanshinone 隱丹參酮35825-57-120mg

脫氫酶10ku瓶

α-Terpineol α-松油醇10482-56-120mg

大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200ml/KIT盒