蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Cathepsin B (CTSB)

CTS-B; APPS; CPSB; APP secretase

型號：GOY-01D1516

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)GPT; ALAT; SGPT; AAT1; GPT1; Serum Glutamic Pyruvic Transaminase; Alanine Transaminase; Glutamate pyruvate transaminase 1; Glutamic--alanine transaminase 1物種：Mouse,，小鼠

轉(zhuǎn)酮醇酶(TKT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Transketolase (TKT)TK; Wernicke-Korsakoff Syndrome物種：Human,，人

外切酶體成分2(EXOSC2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Exosome Component 2 (EXOSC2)RRP4; Rrp4p; hRrp4p; p7; Ribosomal RNA-processing protein 4物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 ALS2CR8 0.2ml

細(xì)胞分裂周期蛋白20B抗體 CDC20B 0.2ml

周期素B3抗體 Cyclin B3 0.2ml

周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體 CDKAL1 0.2ml

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體 CCDC67 0.2ml

HDHD1蛋白抗體 HDHD1 0.2ml

FAM98B蛋白抗體 FAM98B 0.2ml

BOLA1蛋白抗體 BOLA1 0.2ml

鋅指蛋白537抗體 TSHZ3/ZNF537 0.2ml

SAMD7蛋白抗體 SAMD7 0.2ml

組蛋白H3賴9甲基化1C抗體 KMT1C/G9a 0.2ml

環(huán)指蛋白156抗體 RNF156 0.2ml

組織蛋白酶B(CTSB)重組蛋白小鼠Ligustilide 蒿本內(nèi)酯4431-01-020mg

Adenosine 5'-monophosphate 5'-腺嘌呤核苷酸61-19-820mg

Xylene Cyanol FF 二甲苯青FF5g瓶

透析袋 扁寬18 截留分子量10000.5m/即用型管

羊抗人IgM1mg支

Picloram 毒莠啶1g瓶

Rhodamine B 羅丹明 B25g瓶

Cedrol 雪77-53-220mg

酸性(1：50000)250g瓶

4-Dimethylaminopyridine 4-二甲氨基吡啶5g瓶

馬脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200ml/KIT盒

HZ-803大孔吸附樹脂500g瓶