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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 彈性蛋白酶2A(ELA2A)重組蛋白小鼠
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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-13 14:42:16瀏覽次數(shù):185次
聯(lián)系我時(shí),,請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D1475 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Elastase 2A (ELA2A) |
物種 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
彈性蛋白酶2A(ELA2A)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | GOY-01D1475 |
英文名稱:Recombinant Elastase 2A (ELA2A)
ELA1; PE-1; CELA2A; Chymotrypsin-Like Elastase Family Member 2A
型號(hào):GOY-01D1475
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:31.0kDa
實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Cys17~Asn271 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 80%
等電點(diǎn):8.8
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
核酸外切酶1(EXO1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Exonuclease 1 (EXO1)HEX1; hExoI物種:Human,,人
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白英文名稱:Native Carbonic Anhydrase II (CA2)CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C物種:Human,人
胰島素降解酶(IDE)重組蛋白英文名稱:Recombinant Insulin Degrading Enzyme (IDE)Insulysin; Insulin Protease; Abeta-degrading protease; Insulinase物種:Mouse,,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
酸性磷酸酶樣蛋白2抗體 ACPL2 0.2ml
轉(zhuǎn)錄因子HEY2蛋白抗體 HEY2 0.2ml
活化蛋白C抗體 Activated protein C/PROC1 0.1ml
19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體 C19orf24 0.2ml
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體 C1orf67/DNAH14 0.2ml
DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體 DRAM 0.2ml
伴侶蛋白9抗體 CPNE9 0.2ml
星形肌動(dòng)蛋白抗體 ASTN2 0.2ml
RASSF5抗體 RASSF5 0.2ml
囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體 VAPA 0.2ml
磷酸化上皮鈉通道β2抗體 phospho-SCNN1B(Thr615) 0.1ml
抑癌基因SNF2β抗體 SMARCA4/SNF2 beta/BRG1 0.2ml
彈性蛋白酶2A(ELA2A)重組蛋白小鼠Simvastatin 辛伐他丁1g瓶
小鼠臟器組織淋巴細(xì)胞分離液試劑盒200ml/KIT盒
001×7強(qiáng)酸性乙烯系陽(yáng)離子交換樹(shù)脂500g瓶
Tetrahydrocucumin 四氫姜黃素36062-04-120mg
cAMP 環(huán)1g瓶
dNTPs Mix(2.5mM each)500ul支
L-Tryphan L-色73-22-3200mg
羊抗小鼠IgG10mg支
D-(+)-Cellobiose 纖維二糖5g瓶
Sirius Red 天狼猩紅5g瓶
Escin IA 七葉皂苷A123748-68-510mg
Inositol 肌醇100g瓶
Atractylenolide III 白術(shù)內(nèi)酯III73030-71-420mg
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