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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-13 14:10:24瀏覽次數(shù):257次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D1435 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz) |
物種 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上,。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D1435 |
英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz)
PKC2; PKC-Z; PRKCZ; Protein Kinase M Zeta
型號(hào):GOY-01D1435
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
神經(jīng)科學(xué)
物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::Cytoplasm. Endosome. Cell junction
預(yù)測(cè)分子量:30.4kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Leu254~Lys484 (Accession # Q02956) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):6.2
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
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吲哚胺2,3-雙加氧酶2(IDO2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Indoleamine-2,3-Dioxygenase 2 (IDO2)INDOL1; Indoleamine-Pyrrole 2,3 Dioxygenase-Like 1; Indoleamine 2,3-dioxygenase-like protein 1; Indoleamine-pyrrole 2,3-dioxygenase-like protein 1物種:Rat,大鼠
二酰甘油激酶α(DGKa)重組蛋白英文名稱:Recombinant Diacylglycerol Kinase Alpha (DGKa)DGK-A; DAGK; DAGK1; DGK-alpha; 80 kDa diacylglycerol kinase; Diglyceride kinase alpha物種:Mouse,,小鼠
睪蛋白(TEST1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Testisin (TEST1)ESP-1; PRSS21; Protease, Serine 21; Eosinophil serine protease 1物種:Mouse,,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2
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