蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Janus Kinase 3 (JAK3)

JAKL; L-JAK; LJAK; A Protein Tyrosine Kinase,Leukocyte; Leukocyte janus kinase; Tyrosine-protein kinase JAK3

型號(hào)：GOY-01D1398

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Endomembrane system; Peripheral membrane protein. Cytopla

預(yù)測(cè)分子量：29.9kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Leu517~Ala749 (Accession # Q62137) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：胸苷酸合成酶(TYMS)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human,，人)  英文名稱：Active Thymidylate Synthetase (TYMS)

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)氨酶(TAT)活性蛋白  物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)  英文名稱：Active Tyrosine Aminotransferase (TAT)

產(chǎn)品名稱：M2-型丙酮酸激酶(PKM2)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Active Pyruvate kinase isozymes M2 (PKM2)

產(chǎn)品名稱：組織A(CTSA)活性蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)  英文名稱：Active Cathepsin A (CTSA)

產(chǎn)品名稱：脾臟激酶(SYK)活性蛋白  物種：Homo sapiens (Human,，人)  英文名稱：Active Spleen Tyrosine Kinase (SYK)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體 SMC5

磷酸化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體 phospho-STMN2 (Ser50)

染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體 SMC6

染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 SMC2

粘結(jié)蛋白SA2抗體 SA2

染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白4抗體 SMC4

粘結(jié)蛋白SA1抗體 Nuclear protein stromal antigen 1

紡錘體極點(diǎn)構(gòu)成蛋白25抗體 SPC25

磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 phospho-STAT1 (Tyr701)

磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 phospho-STAT3 (Tyr705)

滋養(yǎng)層細(xì)胞糖蛋白5T4抗體 5T4

磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 phospho-STAT6 (Tyr641)

Janus激酶3(JAK3)重組蛋白小鼠Magnolin 木蘭脂素31008-18-120mg

0.4%呂氏堿性美藍(lán)染色液100ml瓶

Allomatrine 641-39-420mg

無粉手套 (50雙/盒)小號(hào)盒

熒光抗體稀釋液10ml瓶

5-Fluoro-2′-deoxyuridine 5-氟-2'-脫氧尿苷100mg瓶

胰-EDTA消化液(0.25%) 含酚紅100ml瓶

Aflatoxin G2 黃曲G27241-98-720mg

N-Acety-L-Cysteine N-乙酰-L-半5g瓶

Thymine 胸腺65-71-450mg

總RNA提取試劑盒50T盒

2ml離心管500支包

Trans-Zeatin 反玉米素50mg支