蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,，然后將重組質粒轉染到細胞中,，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和,，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告,?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上,。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphoinositide Dependent Protein Kinase 1 (PDPK1)

PDK1; PkB-Like 1

型號：GOY-01D1378

信號轉導

酶與激酶

內分泌學

激素代謝

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：33.1kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Lys83~Ala338 (Accession # O15530) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4,，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

產品名稱：羧酸酯酶2(CES2)真核蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Eukaryotic Carboxylesterase 2 (CES2)

產品名稱：脂蛋白關聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)真核蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)  英文名稱：Eukaryotic Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)

產品名稱：基質金屬3(MMP3)真核蛋白  物種：Homo sapiens (Human,，人)  英文名稱：Eukaryotic Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

產品名稱：纖溶酶/抗纖溶酶復合體(PAP)真核蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Eukaryotic Plasmin/Antiplasmin Complex (PAP)

產品名稱：/抗復合體(TAT)真核蛋白  物種：Homo sapiens (Human,，人)  英文名稱：Eukaryotic Thrombin/Antithrombin Complex (TAT)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,，離心10000轉/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后,，轉至新的預冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

公司正在出售的產品：

核糖核蛋白抗原抗體 TRIM21

磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體 phospho-SHC (Tyr317)

血影蛋白A鏈非紅細胞型/收縮蛋白/Spectrin α抗體 Spectrin alpha chain, non-erythrocytic 1

P物質抗體 Substance P

受體1抗體 Somatostatin Receptor 1

受體2抗體 Somatostatin Receptor 2

受體5抗體 Somatostatin Receptor 5

突觸結合蛋白相關基因2抗體 synaptotagmin-2

干燥癥SSB/La抗體 SSB

富含半的酸性分泌蛋白抗體 SPARC

信號轉導和轉錄激活因子2抗體 STAT2

信號轉導和轉錄激活因子3抗體 STAT3

磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)重組蛋白人Friedelan-3beta-ol 表木栓醇16844-71-65mg

γ-aminobutyric acid γ-氨基丁酸20791100mg

Mineraloil 礦物油(液體石蠟)1000ml瓶

一次性針頭式濾器(50個/盒)0.45um個

Glycero 2-phosphate disodium salt β-甘鈉5g瓶

Nourseothricin Sulfate 諾爾絲菌素100mg瓶

Linalool 芳樟醇78-70-620mg

通用RT-PCR試劑盒(M-MLV)100T盒

vitamin B6 維生素B658-56-020mg

羊抗人原-RBITC0.5ml支

PEG 3350 聚乙二醇 33501000g瓶