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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 幾丁質(zhì)酶1(CHIT1)重組蛋白小鼠
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產(chǎn)品型號
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-10 10:50:50瀏覽次數(shù):182次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D958 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Chitinase 1 (CHIT1) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
幾丁質(zhì)酶1(CHIT1)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | GOY-01D958 |
英文名稱:Recombinant Chitinase 1 (CHIT1)
CHI3; Chitotriosidase
型號:GOY-01D958
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:31.5kDa
實(shí)際分子量:32kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Met210~Ser464 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:半連接酶(GCLM)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 英文名稱:Recombinant Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM)
產(chǎn)品名稱:類胰(TPS)重組蛋白 物種:Equus caballus; Equine (Horse,,馬) 英文名稱:Recombinant Tryptase (TPS)
產(chǎn)品名稱:肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) 英文名稱:Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)
產(chǎn)品名稱:(LZM)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 英文名稱:Recombinant Lysozyme (LZM)
產(chǎn)品名稱:絲裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重組蛋白 物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) 英文名稱:Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 14 (MAPK14)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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結(jié)晶紫染色液(1%)100ml瓶
Blue Sepharose 6FF 藍(lán)色-糖凝膠 6FF25mL瓶
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Deoxycholic acid 去氧83-44-320mg
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