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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-10 09:45:30瀏覽次數(shù):198次
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貨號(hào) | GOY-01D883 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Trehalase (TREH) |
物種 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
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產(chǎn)品名稱(chēng):前列腺素E合酶2(PTGES2)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 英文名稱(chēng):Recombinant Prostaglandin E Synthase 2 (PTGES2)
產(chǎn)品名稱(chēng):糖原磷酸化酶B(PYGB)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,,人) 英文名稱(chēng):Recombinant Glycogen Phosphorylase, Brain (PYGB)
產(chǎn)品名稱(chēng):拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(2)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 英文名稱(chēng):Recombinant oisomerase II (2)
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 物種 | 貨號(hào) |
海藻糖酶(TREH)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,,小鼠) | GOY-01D883 |
英文名稱(chēng):Recombinant Trehalase (TREH)
TRE; TREA; Brush Border Membrane Glycoprotein; Alpha,Alpha-Trehalase; Alpha,Alpha-Trehalose Glucohydrolase
型號(hào):GOY-01D883
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU per 1μg
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:33.4kDa
實(shí)際分子量:33.4kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Ser151~Tyr411 (Accession # Q9JLT2) with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):6.2
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
神經(jīng)連接蛋白2抗體 NLGN2
神經(jīng)元Y連鎖蛋白抗體(兒童自閉癥相關(guān)蛋白) NLGN4Y
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Poly-L-Lysine 多聚-L-賴(lài)(15-30萬(wàn))25mg支
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DAPI溶液(即用型)10ml瓶
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Pogostone 廣藿香酮23800-56-820mg
Taq DNA Polymerase5000U支
anti-c-MYC Tag Rabbit Polyclonal antibody100ul瓶
200ul盒裝無(wú)菌吸頭,,50盒/箱96支盒
Mayer’蘇木素染液(免疫組化)10ml瓶
Cholesterol 1kg瓶
Delfinidol Chloride 化飛燕草素528-53-01mg
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