蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告,。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphodiesterase 9A (PDE9A)

High affinity cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 9A

型號：GOY-01D820

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞膜, 細胞質(zhì), 高爾基體

預(yù)測分子量：34.2kDa

實際分子量：35kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ile290~Arg549 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：5.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶μ1(GSTM1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)  英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 1 (GSTM1)

產(chǎn)品名稱：肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)

產(chǎn)品名稱：表皮轉(zhuǎn)酶(TGM3)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)  英文名稱：Recombinant Transglutaminase 3, Epidermal (TGM3)

產(chǎn)品名稱：肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白  物種：Canis familiaris; Canine (Dog,，犬)  英文名稱：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)

產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cβ1(PKCb1)重組蛋白  物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)  英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Beta 1 (PKCb1)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

基質(zhì)金屬3抗體 MMP-3

基質(zhì)金屬2抗體 MMP2

基質(zhì)金屬-7抗體 MMP-7

基質(zhì)金屬-9抗體 MMP9

髓鞘少樹突膠質(zhì)細胞糖蛋白抗體 MOG

多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 MRP1

多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體 MRP2

多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體 MRP3

錯配修復(fù)蛋白2抗體 MSH2

5甲基胞嘧啶抗體 5 MethylCytosine

線粒體核糖體蛋白L28抗體 MrpL28

T淋巴細胞分化蛋白MAL2抗體 MAL2

磷酸二酯酶9A(PDE9A)重組蛋白人Deoxycholic acidsodium salt 脫氧鈉 (進口)25g瓶

Parishin 派立辛62499-28-920mg

SYBR Green I(10000×)50ul瓶

Ginsenoside Rg3 14197-60-520mg

蓋玻片 12×12mm100片盒

人原-HRP0.1ml支

細胞鏟子1.9cm個

B-27 Serum-Free Supplement (50×)10ml支

Cinobufagin 華酥毒基470-37-120mg

Low density lipoprotein,，human 低密度脂蛋白2mg瓶

Phytic acid 植酸83-86-320mg

JM109受體菌1ml支