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產(chǎn)品型號(hào)
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廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-08 16:35:38瀏覽次數(shù):181次
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貨號(hào) | GOY-01D797 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Carboxypeptidase O (CPO) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
羧肽酶O(CPO)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,,人) | GOY-01D797 |
產(chǎn)品名稱:羧肽酶O(CPO)重組蛋白人
英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase O (CPO)
酶與激酶
型號(hào):GOY-01D797
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:41.7kDa
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Tyr21~Leu374 (Accession # Q8IVL8) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過(guò)親和,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:?jiǎn)熙8视?/span>-O-?;D(zhuǎn)移酶2(MOGAT2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Monoacylglycerol-O-acyltransferase 2 (MOGAT2)
產(chǎn)品名稱:甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,,人) 英文名稱:Recombinant Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)
產(chǎn)品名稱:NADP依賴性蘋(píng)果酶2(ME2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,,人) 英文名稱:Recombinant Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondrial (ME2)
產(chǎn)品名稱:蘋(píng)果酸脫氫酶1(MDH1)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Malate Dehydrogenase 1 (MDH1)
產(chǎn)品名稱:微管關(guān)聯(lián)絲/激酶2(MAST2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,,人) 英文名稱:Recombinant Microtubule Associated Serine/Threonine Kinase 2 (MAST2)
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作,;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min,;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體 MAEA
同源結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 MIXL1
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增殖相關(guān)蛋白MAGOH抗體 MAGOH
絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶4抗體 MAP3K4
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同源盒蛋白Meis2抗體 MEIS2
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anti-Flag Tag Mouse Monoclonal antibody100ul瓶
Alantolactone 土木香內(nèi)酯546-43-020mg
201×7凝膠型強(qiáng)堿性陰離子樹(shù)脂500g瓶
抗熒光衰減封片劑5ml瓶
Angiotensin II 血管緊張素Ⅱ10mg支
1.8ml凍存管500個(gè)包
Ampicillin 氨芐青1g瓶
Dihydroartemisinin 雙氫素71939-50-920mg
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