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所 在 地上海市
更新時間:2023-03-08 16:27:31瀏覽次數(shù):137次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D766 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Elastase 3B (ELA3B) |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠 | Rattus norvegicus (Rat,,大鼠) | GOY-01D766 |
產(chǎn)品名稱:彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠
英文名稱:Recombinant Elastase 3B (ELA3B)
CELA3B; Chymotrypsin Like Elastase Family Member 3B; Protease E; Fecal Elastase; Elastase 1; Cholesterol-Binding Pancreatic Protease; Pancreatic Endopeptidase E
型號:GOY-01D766
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::n/a
預(yù)測分子量:27.3kDa
實際分子量:27kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Val28~Asn269 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:5.6
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清),。
3.通過親和,,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
產(chǎn)品名稱:二肽酶3(DPEP3)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,,人) 英文名稱:Recombinant Dipeptidase 3 (DPEP3)
產(chǎn)品名稱:肌肽酶1(CNDP1)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Carnosine Dipeptidase 1 (CNDP1)
產(chǎn)品名稱:雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,,人) 英文名稱:Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)
產(chǎn)品名稱:雙腎上腺皮質(zhì)激素樣激酶1(DCLK1)重組蛋白 物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠) 英文名稱:Recombinant Doublecortin Like Kinase 1 (DCLK1)
產(chǎn)品名稱:脂肪酸去飽和酶2(FADS2)重組蛋白 物種:Homo sapiens (Human,人) 英文名稱:Recombinant Fatty Acid Desaturase 2 (FADS2)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
LIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白3抗體 LDB3
LAMTOR1蛋白抗體 LAMTOR1
ILK結(jié)合蛋白LIMS2抗體 LIMS2
淋巴細胞特異性接頭蛋白抗體 LNK
細胞表面免樣轉(zhuǎn)錄因子4抗體 LILRB2
淋巴細胞抗原6重復(fù)位點蛋白G6F抗體 LY6G6F
樁蛋白抗體 Leupaxin
脂蛋白受體相關(guān)蛋白/低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1抗體 LRPAP1
層粘蛋白α3抗體 LAMA3
溶酶體相關(guān)膜蛋白1抗體 LAMP1
皮屑樣蛋白2抗體 LEPREL2
羧肽酶抑制劑抗體 Lxn/Latexin
彈性蛋白酶3B(ELA3B)重組蛋白大鼠豬IgG干粉1g支
TTC 2,3,5化三苯基四氮唑1g瓶
圓蓋玻片 直徑24mm100片盒
NHS-Biotin -N-羥基丁二酰亞胺活化脂25mg瓶
p-Hydroxybenzaldehyde 對羥基123-08-0100mg
Trehalose 無水海藻糖99-20-720mg
LB Broth LB肉湯250g瓶
S-(-)-Carbidopa 38821-49-720mg
Panaxadiol 人參二醇19666-76-320mg
Sodium Danshensu 丹參素鈉20977-05-320mg
DiI 熒光染料10mg瓶
Isocorynoxeine 異去氫鉤藤堿51014-29-020mg
Nalidixic acid 萘啶酮酸10g瓶
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