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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
中級會(huì)員 | 第10年

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前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素5(PCSK5)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-08 15:54:42瀏覽次數(shù):187次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D758 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin
物種 Homo sapiens (Human,人)
前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素5(PCSK5)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:軸抑制蛋白2抗體 英文名稱:Axin 2 0.2ml血管生成素相關(guān)蛋白6抗體 英文名稱:ANGPTL6 0.2ml蛋白激酶受體A8抗體 英文名稱:EphA8 0.2ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素5(PCSK5)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,,人)

GOY-01D758

 

 

英文名稱:Recombinant Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 5 (PCSK5)

PC5; PC6; PC6A; SPC6; Subtilisin/kexin-like protease PC5; Proprotein convertase 5

型號:GOY-01D758

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測分子量:40.8kDa

實(shí)際分子量:41kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Asp115~Met454 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):5.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:彈性2B(ELA2B)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,,人)  英文名稱:Recombinant Elastase 2B (ELA2B)

產(chǎn)品名稱:彈性3A(ELA3A)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Elastase 3A (ELA3A)

產(chǎn)品名稱:彈性3B(ELA3B)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,,人)  英文名稱:Recombinant Elastase 3B (ELA3B)

產(chǎn)品名稱:彈性3B(ELA3B)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)  英文名稱:Recombinant Elastase 3B (ELA3B)

產(chǎn)品名稱:原B1(CTRB1)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Chymotrypsinogen B1 (CTRB1)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

LAD1蛋白抗體 LAD1

抗體 lysozyme

LAP2抗體 LAP2 alpha

富含重復(fù)蛋白6抗體 LRRC6

低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白12抗體(抑制腫瘤蛋白7) LRP12

磷酸化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 phospho-LLGL1 + LLGL2(Ser650+Ser654)

低密度脂蛋白受體抗體 LDL receptor

瘦素抗體 Leptin

淋巴細(xì)胞特異性蛋白激酶抗體 Lck/p56-LCK

白細(xì)胞免樣受體8抗體 CD85c

乳腺腫瘤自身抗原LMO4抗體 LMO4

白三烯B4受體1抗體 LTB4-R1/BLTR

前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素5(PCSK5)重組蛋白人己糖激酶1(HK1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Hexokinase 1 (HK1)

葡萄糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口

甘露糖受體C2(MRC2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mannose Receptor C Type 2 (MRC2)

無菌小鼠血清/Sterile Defidrinated Mouse BloodBR100/500毫升國產(chǎn)/進(jìn)口

補(bǔ)體因子H(CFH)重組蛋白英文名稱:Recombinant Complement Factor H (CFH)

中國藍(lán)糖/中國藍(lán)/China Blue Lactose Agar弱選擇性培養(yǎng)基,,腸道致病菌選擇分離250克國產(chǎn)/進(jìn)口

小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

2V6.11(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SK-BR-3(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

新生兒表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

 


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