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拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2b)重組蛋白人

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更新時(shí)間:2023-03-08 15:42:59瀏覽次數(shù):282次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D744 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Topoisomerase II Beta (TOP2b)
物種 Homo sapiens (Human,,人)
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2b)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 英文名稱:phospho-ASK1 (Ser967) 0.2ml磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 英文名稱:phospho-ASK1 (Thr845) 0.1ml磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 英文名稱:Phospho-ATP1A1 (Tyr10) 0.1ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)  英文名稱:Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR)

產(chǎn)品名稱:糖原合酶激酶3β(GSK3b)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,,人)  英文名稱:Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b)

產(chǎn)品名稱:糖原合酶激酶3β(GSK3b)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b)

產(chǎn)品名稱:鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2a)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha (CAMK2a)

產(chǎn)品名稱:鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2a)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)  英文名稱:Recombinant Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha (CAMK2a)

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2b)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,,人)

GOY-01D744

 

 

英文名稱:Recombinant Topoisomerase II Beta (TOP2b)

TOPIIB; Top2beta; DNA topoisomerase II, beta isozyme

型號(hào):GOY-01D744

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核

預(yù)測(cè)分子量:27.5kDa

實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Gly458~Asp667 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):8.7

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清),。

3.通過親和,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作,;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min,;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法,、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

劍蛋白p80抗體 katanin p80

驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1B抗體 KIF1B

腎病樣蛋白1抗體 KIRREL1

組蛋白H3K9甲基轉(zhuǎn)移酶4抗體 SETDB1

鉀離子通道蛋白家族成員3抗體 KCNE3

角蛋白82抗體 Keratin82

20號(hào)染色體開放閱讀框19抗體 C20orf19

細(xì)胞角膜蛋白多糖抗體 Keratocan

3/3抗體 Prostate Specific Antigen

上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體 KLF1, 2, 4

含賴卷曲螺旋蛋白1抗體 KRCC1

腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體 KLF4

拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2b)重組蛋白人改良BPLS/BPLS Agar Modified各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

腦紅蛋白(NGB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neuroglobin (NGB)

賴脫羧酶肉湯發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

5(KLK5)重組蛋白英文名稱:Recombinant Kallikrein 5 (KLK5)

七葉苷發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

干擾素α4(IFNα4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Interferon Alpha 4 (IFNa4)

人腎透明細(xì)胞皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱:Caki

科瑪嘉李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 規(guī)格: 1000ml/瓶 用途:

NCI-H2170(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

VE(人血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

 


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