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細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-08 15:26:40瀏覽次數(shù):338次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D715 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR)
物種 Homo sapiens (Human,人)
細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人泛素(UBB)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/ml人尿皮質(zhì)素3ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL纈(Valine)ELISA試劑盒96T 1.56-100 nmol/mL

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,,人)

GOY-01D715

 

 

英文名稱:Recombinant Cytochrome P450 Reductase (CPR)

POR; CYPOR; P450R; P450(Cytochrome)Oxidoreductase; NADPH--cytochrome P450 reductase

型號(hào):GOY-01D715

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測(cè)分子量:53.3kDa

實(shí)際分子量:53kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Gly77~Phe518 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):5.0

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,,離子交換,,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱:芳香酶(ARO)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,,人)  英文名稱:Recombinant Aromatase (ARO)

產(chǎn)品名稱:芳香酶(ARO)重組蛋白  物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)  英文名稱:Recombinant Aromatase (ARO)

產(chǎn)品名稱:外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶2(ENPP2)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,,人)  英文名稱:Recombinant Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 2 (ENPP2)

產(chǎn)品名稱:膽鹽依賴性脂肪酶(BSDL)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,,人)  英文名稱:Recombinant Lipase, Bile Salt Dependent (BSDL)

產(chǎn)品名稱:丁酰酯酶(BCHE)重組蛋白  物種:Homo sapiens (Human,人)  英文名稱:Recombinant Butyrylcholinesterase (BCHE)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min,;

6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

艾杜糖-2-酯酶抗體 Iduronate 2 sulfatase

Bipped B樣蛋白抗體 IDN3

α-L-艾杜糖苷酶抗體 IDUA

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白122抗體 IFT122

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白140抗體 IFT140

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白20抗體 IFT20

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體 IFT43

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白80抗體 IFT80

免超家族成員5抗體 IGSF5

alpha干擾素誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白2抗體 IFI27L2

CD101抗體 CD101

胰島素抗體 Insulin

細(xì)胞色素P450氧化還原酶(CPR)重組蛋白人人腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SW 982(人滑膜肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

半糖凝集素9(GAL9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Galectin 9 (GAL9)

Rustigian氏尿素培養(yǎng)液/ Rustigian氏尿素肉湯/Rustigian Urea Broth細(xì)菌尿素酶試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

LS 180(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

血平板 (成品培養(yǎng)基) 規(guī)格: 20個(gè)/盒 用途: 用于營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)

去氧鹽枸櫞酸鹽糖蔗糖/DCLS/DCLS Agar致病性腸桿菌的分離250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

胰島素受體(ISR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Insulin Receptor (ISR)

小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠白血病細(xì)胞英文名稱:M1

親環(huán)素B(CYPB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclophilin B (CYPB)

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