蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carboxypeptidase A3 (CPA3)

MC-CPA; Mast cell carboxypeptidase A; Carboxypeptidase A3, Mast Cell

型號：GOY-01D623

酶與激酶

感染免疫

風(fēng)濕病學(xué)

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：66.0kDa

實(shí)際分子量：66kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ile110~Ser417 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：8.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬9(MMP9)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

產(chǎn)品名稱：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human,，人)  英文名稱：Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)

產(chǎn)品名稱：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)  英文名稱：Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)

產(chǎn)品名稱：甲狀腺過氧化物酶(TPO)重組蛋白  物種：Homo sapiens (Human，人)  英文名稱：Recombinant Thyroid Peroxidase (TPO)

產(chǎn)品名稱：甲狀腺過氧化物酶(TPO)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)  英文名稱：Recombinant Thyroid Peroxidase (TPO)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

羥基類固醇脫氫酶11β1抗體 HSD11B1

羥類固醇脫氫酶17β3抗體 HSD17B3

滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD抗體 HSD3B1

乙?；M蛋白H4抗體 Acetyl-Histone H4(K8)

磷酸化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1 phospho-HMGN1(Ser20+Ser24)

附睪分泌蛋白4抗體 HE4

三甲基化組蛋白H3抗體 Histone H3 (Tri Methyl K4)

三羥基三甲基還原酶抗體 HMGCR

肝癌相關(guān)抗原hca25a HCA25a

己糖激酶3抗體 Hexokinase 3

乙酰肝素蛋白多糖2 Heparan Sulfate Proteoglycan 2

人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗體 HBV pre S1 protein

羧肽酶A3(CPA3)重組蛋白人PC-3M-2B4(人前列腺低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)5×106cells/瓶×2

小鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

Caki-2(人腎透明細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SW480(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)重組蛋白英文名稱：Recombinant Calcitonin Gene Related Peptide (CGRP)

匹克氏肉湯基礎(chǔ)B/Pick，s Broth Base B一次性使用衛(wèi)生用品中溶血性鏈球菌的檢驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)

脫脂奶粉/無脂肪奶粉/Nonfat-Dried Milk蛋白組級250克國產(chǎn)/進(jìn)口

成纖維細(xì)胞生長因子4(FGF4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Fibroblast Growth Factor 4 (FGF4)