蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上,。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Arachidonate-15-Lipoxygenase (ALOX15)

LOX15; 15-LOX2; 15-LOX1; 15-LOX; 12-LOX; ALOX15; 15-LO; 15-LPG; LOG15; Lipoxygenase 15; Arachidonate 12-lipoxygenase, leukocyte-type; Arachidonate omega-6 lipoxygenase

型號(hào)：GOY-01D368

酶與激酶

代謝通路

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：17.3kDa

實(shí)際分子量：17kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys170~Leu312 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4,，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：5.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Monoamine Oxidase B (MAOB)  產(chǎn)品名稱：單氨氧化酶B(MAOB)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 21 (MMP21)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬21(MMP21)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Myosin Light Chain Kinase 2 (MYLK2)  產(chǎn)品名稱：肌球蛋白輕鏈激酶2(MYLK2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Phosphofructokinase, Platelet (PFKP)  產(chǎn)品名稱：血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Tyrosine Kinase 2 (Tyk2)  產(chǎn)品名稱：激酶2(Tyk2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Fyn Related Kinase (FRK)  產(chǎn)品名稱：Fyn相關(guān)激酶(FRK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

DDX4抗體 DDX4

DDX58抗體 DDX58

鴨瘟病毒DPV抗體 Duck plague virus

交聯(lián)二聚體抗體 D-DIMER

腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體 Drebrin

DNA斷裂因子抗體（激活脫氧核糖核酸酶） DFFB

脫氧核糖核酸酶γ抗體 DNase gamma

死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體 DATF1

脫氧核糖核酸酶2抗體 DNase II

細(xì)胞死亡防衛(wèi)蛋白1抗體 DAD1

脫氧核糖核酸酶1抗體 DNase I

Duffy血型趨化因子受體抗體 DARC

花生四烯酸-15-脂加氧酶(ALOX15)重組蛋白人地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

桔橙小單孢菌 Micromonospora aurantiaca

胰(含100mL 酶解緩沖液)10mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae紫色變異鏈霉菌 Streptomyces violovariabilis

NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系檸檬綠木霉

猴菌豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶蘇云金芽胞桿菌東北亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tohokuensis

茯苓 Poria cocos

單核細(xì)胞增生李氏桿菌 Listeria monocytogenes

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii木瓜(含10mL酶解緩沖液)

普雷恩毛霉 Mucor prainii楊奇青霉 Penicillium janczewskii

香菇 Lentinula edodes尖孢鐮刀菌棉花?；?Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum

植物桿菌 Lactobacillus plantarum涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis