產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase (PDP)

PDP1; PDH; PPM2C; Protein Phosphatase 2C Magnesium-Dependent Catalytic Subunit; Pyruvate Dehyrogenase Phosphatase Catalytic Subunit 1

型號(hào)：GOY-01D366

酶與激酶

代謝通路

肝膽病學(xué)

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：Mitochondrion matrix

預(yù)測分子量：29.6kDa

實(shí)際分子量：29.49kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Asn315~Glu537 (Accession # Q9P0J1) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Cathepsin A (CTSA)  產(chǎn)品名稱：組織A(CTSA)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle,，牛)

英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 10 (ADAMTS10)  產(chǎn)品名稱：血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶10(ADAMTS10)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase VIII (CA8)  產(chǎn)品名稱：碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase, AMP Activated Gamma 3 (PRKAg3)  產(chǎn)品名稱：AMP激活蛋白激酶γ3(PRKAg3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 3 (PDK3)  產(chǎn)品名稱：丙酮酸脫氫酶激酶同工酶3(PDK3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 12 (HSD17b12)  產(chǎn)品名稱：17-β-羥基類固醇脫氫酶12(HSD17b12)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

周期素D相互作用蛋白1抗體 DMTF1

腦發(fā)育同源蛋白2抗體 DBX2

精發(fā)育相關(guān)蛋白DDX3Y抗體 DDX3Y

核仁蛋白NAP57抗體 DKC1

DLST蛋白抗體 DLST

橋粒斑蛋白1+2抗體 Desmoplakin I+II

橋粒芯糖蛋白2抗體 Desmoglein 2

生殖細(xì)胞發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL抗體 DAZL

死亡受體5抗體 DR5

橋粒芯糖蛋白4抗體 Desmoglein 4

DNA聚合酶γ抗體 DNA polymerase delta

自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體 DAP12

丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)重組蛋白人大鼠表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

酸克魯維酵母 Kluyveromyces lactis小單孢菌 Micromonospora sp.

COS-7(非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞)中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株人腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisC6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

細(xì)黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

紅色鏈孢囊菌 Streptosporangium rubrum毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

窄脊正青霉 Eupenicillium angustiporcatum米根霉

異常漢遜酵母 Hansenula anomala豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞)蘇云金芽胞桿菌九州亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kyushuensis

熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSwiss albion小鼠胚胎成纖維細(xì)胞

植物桿菌 Lactobacillus plantarum人腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物桿菌 Lactobacillus plantarum