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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>蛋白>>重組蛋白/RP>> 內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白兔
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-06 09:46:13瀏覽次數(shù):194次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D360 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Endothelial NOS (eNOS) |
物種 | Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) |
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
英文名稱:Recombinant Aminopeptidase A (ENPEP) 產(chǎn)品名稱:谷氨氨肽酶(ENPEP)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,,人)
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產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白兔 | Oryctolagus cuniculus (Rabbit,兔) | GOY-01D360 |
英文名稱:Recombinant Endothelial NOS (eNOS)
NOS3; ECNOS; NOS III; E-NOS; C-NOS; ENOS; CNOS; Constitutive NOS; Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial
型號:GOY-01D360
酶與激酶
心腦血管
物種:Oryctolagus cuniculus (Rabbit,,兔)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:-
實(shí)際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,,離子交換,,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,,純度最高可達(dá)90%以上,。
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,,離心10000轉(zhuǎn)/分,,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,,即為全蛋白提取物,,蛋白定量(Bradford法、BCA法),;
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,,混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min,;
6. 14,000rpm,,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法,、BCA法),;
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
抑癌蛋白DKK3抗體 DKK3
胞漿動(dòng)力蛋白中間鏈2抗體 DYNC1I2
單克隆抗體 Digoxin(2E2)
腫瘤壞死因子配體超家族成員10C DcR1
干擾素誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體 DNAJC3
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體 DACH2
穿膜蛋白DLK1抗體 DLK1
Dysferlin蛋白抗體 Dysferlin
死亡相關(guān)蛋白5抗體 DAP5
解旋酶DEAD5抗體 DDX19B
防御素β2/Defensin β2抗體 Defensin Beta 2
細(xì)胞間粘附分子非整合素蛋白3抗體 DC-SIGN
內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白兔大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum廣州蒼白桿菌 Escherichia coli
迪慶綿羊皮膚成纖維樣細(xì)胞根瘤菌 Rhizobium sp.
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)人胰腺細(xì)胞
EPC, 大鼠血管內(nèi)皮祖細(xì)胞小鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基
白地霉 Geotrichum candidum桿菌屬 Lactobacillus sp.
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii弗氏鏈霉菌* Streptomyces fradiae
U14(小鼠子宮頸細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
MKN45(人胃細(xì)胞)香菇 Lentinula edodes
小鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
擬囊體側(cè)耳 Pleurotus cystidiosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
根土壤桿菌 Agrobacterium tumefaciens真姬菇 Hypsizigus marmoreus
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