產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：糖原磷酸化酶L(PYGL)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Glycogen Phosphorylase, Liver (PYGL)

GPLL; GPBB; Hers Disease; Glycogen Storage Disease Type VI

型號(hào)：GOY-01D347

酶與激酶

代謝通路

內(nèi)分泌學(xué)

物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4,，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和,，離子交換,，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白,。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告,。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上,。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosamine-6-Sulfatase (GALNS)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰酯酶(GALNS)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosamine-6-Sulfatase (GALNS)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰酯酶(GALNS)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Deoxyribonuclease I Like Protein 2 (DNASE1L2)  產(chǎn)品名稱：脫氧核糖核酸酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase A4 (GSTA4)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶α4(GSTA4)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Palmitoyl Protein Thioesterase 1 (PPT1)  產(chǎn)品名稱：棕櫚酰蛋白硫酯酶1(PPT1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Dipeptidyl Peptidase 7 (DPP7)  產(chǎn)品名稱：二肽基肽酶7(DPP7)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊,，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作,；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min,；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑,， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer,，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm,，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）,；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族5成員A抗體 CLEC5A

半胱胺酸蛋白9-p10抗體 caspase-9 p10

周期素依賴激酶1抗體 CDK1

細(xì)胞衰老抑制基因抗體 RSL1D1

環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 CREB-1

酪蛋白激酶1γ1抗體 CSNK1G1

21號(hào)染色體開放閱讀框88抗體 C21orf88

21號(hào)染色體開放閱讀框54抗體 C21orf54

周期素依賴性激酶9抗體 Cyclin T1

細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 Cdc6

細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 CHK2

細(xì)胞周期調(diào)控因子34 CDC34

糖原磷酸化酶L(PYGL)重組蛋白小鼠小鼠直腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基UACC-812(人腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞)

桿菌屬 Lactobacillus sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

串珠鐮孢 Fusarium moniliforme印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana

熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞)

桿菌 Lactobacillus sp.

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

弗氏鏈霉菌 Streptomyces fradiae

戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceusMN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

T24, 人膀胱細(xì)胞人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

丁酸梭菌 Clostridium butylicumEBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細(xì)胞

香菇屬 Lentinula sp.

松杉暗孔菌 Phaeolus schweinitzii