產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Caspase 3 (CASP3)

CPP32; CPP32B; SCA1; Apoptain; Yama; Apoptosis-Related Cysteine Peptidase; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 3; SREBP cleavage activity 1

型號(hào)：GOY-01D253

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

細(xì)胞凋亡

腫瘤免疫

感染免疫

物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：20.3kDa

實(shí)際分子量：20kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser29~Asp175 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和,，離子交換,，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量,。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性,。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白,，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)  產(chǎn)品名稱：脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog,，犬)

英文名稱：Recombinant Casein Kinase 1 Alpha 1 (CSNK1a1)  產(chǎn)品名稱：酪蛋白激酶1α1(CSNK1a1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase Kinase 5 (MAP4K5)  產(chǎn)品名稱：絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶5(MAP4K5)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant p21 Protein Activated Kinase 4 (PAK4)  產(chǎn)品名稱：p21蛋白激活激酶4(PAK4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase D2 (PKD2)  產(chǎn)品名稱：蛋白激酶D2(PKD2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human,，人)

英文名稱：Recombinant Alanine Aminopeptidase (AAP)  產(chǎn)品名稱：氨肽酶(AAP)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,，離心10000轉(zhuǎn)/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液,；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后,，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融,。

公司正在出售的產(chǎn)品：

泛素載體蛋白R2抗體 CDC34B

碳酸酐酶12抗體 CA12

細(xì)胞粘附分子3抗體 CADM3

整合素相關(guān)蛋白CD47 CD47

磷酸化細(xì)胞角蛋白8抗體 phospho-CK8 (Ser23)

鈣結(jié)合蛋白D28K抗體 Calbindin

磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 phospho-Crkl(Tyr251)

磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 phospho-Crkl (Tyr207)

磷酸化絲切蛋白抗體 Phospho-Cofilin (Ser3)

皮層肌動(dòng)蛋白抗體 Cortactin

促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體1抗體 CRHR1

促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體 CRHR2

胱天蛋白酶3(CASP3)重組蛋白大鼠釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeMCF-7（MCF7）（ATCC來源）, 人腺細(xì)胞

人胚皮膚成纖維樣細(xì)胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

棲土曲霉 Aspergillus terricola費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

香菇 Lentinula edodesUACC-812(人腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum色褐鏈霉菌 Streptomyces chromofuscus

小鼠淋巴瘤細(xì)胞香菇 Lentinula edodes

冬擬多孔菌吳茱萸堿

TE-11(人食管細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

芽胞桿菌 Bacillus sp.佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida

NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePC-3M(人前列腺細(xì)胞)

EL-4全細(xì)胞裂解液苜蓿中華根瘤菌