蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中,，通過瞬時表達產生目標蛋白,。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）,。

3.通過親和,，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白,。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量,。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告,?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上,。

產品屬性：

產品名稱：磷脂酶A2激活蛋白(PLAP)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2 Activating Protein (PLAP)

PLAA; PLA2P; PLA2-P; DOA1

型號：GOY-01D229

酶與激酶

代謝通路

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：18.1kDa

實際分子量：22kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Glu162~Ala312 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：4.8

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Peroxiredoxin 3 (PRDX3)  產品名稱：過氧化還原酶3(PRDX3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glucosidase Alpha, Acid (GaA)  產品名稱：酸性葡糖苷酶α(GaA)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

英文名稱：Recombinant Galactosidase Beta (GLb)  產品名稱：半乳糖苷酶β(GLb)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat,，大鼠)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog,，犬)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Ovis aries; Ovine (Sheep，綿羊)

英文名稱：Recombinant Myosin Light Chain Kinase (MYLK)  產品名稱：肌球蛋白輕鏈激酶(MYLK)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse,，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑,， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用,。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer,，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,，離心10000轉/分,，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中,，即為全蛋白提取物,，蛋白定量（Bradford法、BCA法）,；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后,，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中,， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,，1000轉/分離心5 min洗兩次,；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,，混勻,。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后,，轉至新的預冷的離心管中,，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上,，溫和振蕩15 min,；

6． 14,000rpm，4℃離心15min,，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法,、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融,。

公司正在出售的產品：

畸胎瘤衍化生長因子抗體(N端) CRIPTO

CD59抗體 CD59

鈣激活14抗體 Calpain 14

細胞角蛋白18抗體（C端） CK18

7型膠原抗體 Collagen VII

磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 Phospho-Beta Catenin (Thr41 + Ser45)

原癌蛋白CBL2抗體 CBL2

信號調節(jié)蛋白α抗體 SIRP Alpha

巨噬細胞炎性蛋白16抗體 CCL16

果蠅CG6856-PA抗體 CG6856-PA

信號淋巴細胞活化分子CD150抗體 CD150

氧化酶COX7A2抗體 COX7A2

磷脂酶A2激活蛋白(PLAP)重組蛋白人人輸尿管上皮細胞培養(yǎng)基COLO 320DM(人結直腸腺細胞)

泡盛曲霉 Aspergillus awamori釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

非洲爪蟾胚胎細胞植物桿菌 Lactobacillus plantarum

涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli

MS751(人子宮頸表皮細胞)結晶紫染色液

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactisCaki-1, 人腎透細胞皮膚轉移細胞

酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris總狀毛霉 Mucor racemosus

鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.大鼠小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)基

人肺泡上皮細胞培養(yǎng)基嗜鞣管囊酵母 Pachysolen tannophilus

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

小鼠表皮角質形成細胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

胰凝(含100mL酶解緩沖液)Annexin V-FITC/PI雙染法細胞凋亡檢測試劑盒

植物桿菌 Lactobacillus plantarum粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe